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实验八紫外可见分光光度法定性、定量分析苯酚
一、目的要求
1.了解UV—3150型紫外可见分光光度法的构造、性能及使用方法。
2.学会分析光度法制作标准曲线的方法。
3.掌握紫外可见分光光度法测定物质含量的实验技术。
二、基本原理
1.紫外—可见近红外分光光度计的构造及原理
紫外—可见分光光度计由电源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记
录系统(计算机)等组成。
(1)光源光源的作用是提供激发能,使待测分子产生吸收。要求能够提供
足够强的连续光谱、有良好的稳定性、较长的使用寿命,且辐射能量随波长无明
显变化。常用的光源有热辐射光源和气体放电光源。
(2)单色器单色器的作用是使用光源发出的光变成所需要的单色光。通常
由入射狭缝、准直镜、色散元件、物镜和出射狭缝构成。
(3)吸收池用于盛放试液。石英池用于紫外可见区的测量,玻璃池只用于
可见区。
(4)检测器简易分光光度计使用光电池或光电管作为检测器。最常见的检
测器是光电倍增管。光电倍增管的特点是在紫外—可见区的灵敏度高,响应快。
2.分光光度法的分析原理
紫外可见分光光度法,即紫外—可见吸收光谱法,它是研究分子吸收紫外—
可见波长范围内的吸收范围。分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团
吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光
谱,反映了分子中某些基团的信息。可以使用标准光谱再结合其他手段进行定性
分析。
分光光度计是利用物质分子对某一特定波长光有强吸收,其吸收程度与溶液
中物质浓度有定量关系,根据朗伯比尔定律:A=εbc,可以对溶液进行定量分析。
三、实验内容与方法
(1)仪器与试剂
UV—3150型紫外可见分光光度计;容量瓶,比色管,移液管,苯酚样品
(2)操作步骤
①打开仪器以及计算机,进入软件操作程序,待仪器自检结束,进行操作。
②设定光谱测定条件,进行测定。
③测定结束,关闭仪器并整理实验器材。
四、数据分析
浓度(ppm)01020304060
Abs00.1680.3220.4860.661.008
Y=-0.00589+0.01675*X
1.0
2
R=0.99948
0.8
0.6
bAs
0.4
0.2
0.0
0102030405060
浓度ppm
由图中标准方程可得,待测样品的平均吸光度为,从而得到,待测样品的浓
度为20.650ppm.
1.6
1.4
1.2
1.0
bs
A
0.8
0.6
0.4270
0.2
0.0
200250300
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