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运用植物体细胞杂交技术,打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育新的作物类型那么,有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交,培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢?
实例1:自然条件受精作用卵细胞精子
实例2:1970年,动物细胞融合实验人细胞鼠细胞红色荧光染料标记的膜蛋白绿色荧光染料标记的膜蛋白细胞融合人鼠杂交细胞37°培养40min细胞融合灭活的仙台病毒诱导
第2节动物细胞工程01动物细胞融合技术二、动物细胞融合技术与单克隆抗体
一、动物细胞融合技术1、定义:指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2、原理:细胞膜的流动性诱导融合3、结果:融合形成杂交细胞具有原来两个细胞的遗传信息
4、融合方法:诱导融合与植物原生质体融合的方法相同物理方法:电融合法、离心法化学方法:聚乙二醇(PEG)融合法生物方法:灭活病毒诱导法(动物细胞融合特有)
【问题1】灭活病毒诱导细胞融合的原理(1)灭活:(2)灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么?病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构。动物细胞融合完成的标志?细胞核的融合
【问题2】19世纪30年代,科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中,观察到多核细胞。如何解释这一现象?病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。诱导融合
5.意义:6.应用:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交(种间、属间、科间、动植物之间)成为可能。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体。
植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞电融合法、离心法;聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能
(1)与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒()(2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构()(3)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞()判断常考语句,澄清易混易错
下列关于动物细胞融合的说法,错误的是 ()A.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的多核细胞称为杂交细胞B.动物细胞融合已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段C.常用于诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等D.细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能A
一、概念检测1.下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述,错误的是()A.它们的原理都涉及细胞膜的流动性B.都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合C.融合前都需用纤维素酶或果胶酶处理细胞D.前者主要为了获得细胞产品,后者主要为了获得杂种植株C
产量低,纯度低,制备的抗体特异性差、反应不灵敏反复注射动物体内抗原多种浆细胞多种抗体(血清)每一个浆细胞只能产生一种特异性抗体体内产生的特异性抗体多达百万种缺点单克隆抗体技术1.机体通过什么免疫过程分泌抗体?体液免疫2.抗体主要分布在哪里?血清3.早期获得抗体的方法有哪些
动物会接触多种天然抗原,体内相应产生的特异性抗体种类可以达到百万种以上,但每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。因此,要想获得大量的单一抗体,必须克隆单一的淋巴细胞,形成细胞群。面临问题:在体外培养条件下,一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的。因为单个B淋巴细胞寿命有限,又因为能产生抗体的B淋巴细胞属于高度分化的细胞,不能无限繁殖不可能无限增殖。如何解决这个问题呢?
米尔斯坦科勒由于发明了单克隆抗体的制备技术,米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖如何获得既能无限增殖又能产生抗体的细胞?B淋巴细胞骨髓瘤细胞分泌抗体无限增殖杂交瘤细胞+=产生抗体大量增殖在体外培养条件下,能大量增殖。动物细胞融合技术
单克隆抗体的制备过程注射特定的抗原培养骨髓瘤细胞多种B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合用特定的抗原免疫,从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。不是为了得到
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