2025年高二年级下册学期生物浙科版选择性必修3----1.2.1纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得课件（共30张PPT））(含音频+视频).pptxVIP

第一章发酵工程;1.接种方法;2.单菌落分离;例题1.;3．平板划线法：

(1)原理：接种环划线的过程中，菌液被逐渐稀释，最终出现单个细菌，培养后形成单菌落。

(2)方法：通常用___________

蘸取液体培养物或挑取固体

表面的微生物后，在固体培

养基表面进行连续平行划线

、______________或其他形式

的划线，以实现接种的目的。

(3)划线方式的比较

;;（4）过程：;;;;用接种环蘸菌液____次，在固体培养基表面划线，下一次划线应从上一次划线的______开始。每次划线前接种环要，聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后培养，可以在划线的末端出现不连续的。若共划线4次，接种环要烧灼____次。另外：每次划线都不能与之前的线条_____；不能将最后一次划线与第一次划线相连；不能_____培养基。

培养基需后，放入培养箱培养。;4．稀释涂布平板法

接种时，通常需要先将菌液进行_____________，并在培养皿侧面或底面做好标记后，将稀释度不同的菌液各取0.1mL，（移液管或枪）加在固体培养基表面，然后用___________将菌液均匀地涂布。

在培养基表面上进行培养。这样在稀释度适当的固体培养基表面也能得到单个细胞生长繁殖成的单菌落。根据菌落的形状，大小、颜色、边缘或表面光滑与否等特征可以选取目标微生物继续培养。

;②操作过程：梯度稀释;②操作过程：梯度稀释→涂布;②操作过程：梯度稀释→涂布→倒置培养;③作用：对菌落进行分离、计数;例：将1g土样加到盛有99ml无菌水的三角瓶中，如图进行稀释，每个稀释度涂布三个平板，根据结果计算1g土样中菌的数量？;;讨论

1.判断液体培养基成功接种酵母菌的依据是什么？

2.如何判断是否分离出酵母菌的单菌落？判断依据是什么？

;3.在固体培养基表面涂布的菌种是否出现形态、颜色不同的单菌落？你认为出现该现象的原因是什么？

4.仅从菌落特征是否能够认定你分离出了酵母菌？怎样进行进一步的鉴定？;自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下列是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。

（1）实验步骤∶

①制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。

②为了得到更加准确的结果，应选用法接种样品。

③适宜温度下培养。

（2）结果分析∶

①测定大肠杆菌数目时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，其中正确的是（)

A.一个平板，统计的菌落数是230

B.两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240

C.三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26

D.四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250;②某同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为26.5，那么每毫升样品中的细菌数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL）。

③用这种方法测定的大肠杆菌密度，实际活菌数量要比测得的数量，为什么？

;计数微生物——显微镜计数法;1.每个血细胞计数板的正中央有2个计数区。各9个大方格（中央为红细胞计数区，4个角为白细胞计数区）

2.红细胞计数区共400个小方格。;①大方格：_____个。长、宽各1mm。1个大方格液体体积＝1mm2×0.1mm＝0.1mm3(0.1×10-3mL)。计数区正中间的大方格为___________计数区。四角的四个大方格是_________计数区。

②中方格：红细胞计数区又用双线分成______(或16)个中方格。

③小方格：每个中方格再用单线划分为______(或25)个小方格。所以一个计数区共有个小方格。

(4)计数时的几个注意点

①滴加菌液要避免菌液滴到盖玻片上并防止，

以免影响计数结果。先盖盖玻片再滴加菌液，让菌液自行渗入，

②对有25个中方格的红细胞计数区可采用_________法对酵母细胞进行计数。;母细胞进行计数。

③在计数每一小方格中的细胞数时，为了避免重复计数压在小方格边缘线上细胞的数目，应

_____________________________。

④为了保证结果的可信度，消除误差，应对同一红细胞计数区中的细胞数进行_____次计数后取平均值，再按比例进行换算。