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RecA-P;三種功能●DNA重組活性●與S.S.DNA結合活性●少數蛋白的proteinase活性當DNA正常複製時(無複製受阻,無DNA損傷,無TTdimer)RecA-p不表現proteinase活性當DNA複製受阻/DNAdamaged能量大量消耗細胞內原少量表達的RecA-p與S.S,DNA結合啟動RecA-p的proteinase活性修復損傷LexA-p降解RecA-p高效表達300timesupSOSopen當DNA複製度過難關後SOSrepair是一種error-prone極強的修復機制是進化中形成的“竭盡全力,治病救人”的措施(正常狀態下,SOS是關閉的)RecA-p很快消失LexAgeneonSOSoff7.3.2.5.突變的形成DNA未經修復經過修復/校正死亡突變率降低傾向差錯修復(間接)(重組修復,SOS)避免差錯修復(直接)(光修復,切補修複)形成突變不形成突變DNAdamaged/mispairing物理誘變,化學誘變,自發突變突變是在修復過程中形成的(非準確的修復)7.3.3.基因的回復突變(backmutation/reversemutation)7.3.3.1.回復突變的概念wildtypemutant(inphenotype)mutation(lowF.)backmutation(verylowF.)7.3.3.2.回復突變的分子機制a)AGC(Ser)?ACC(Thr)?AGC(Ser)b)AGC(Ser)?AGG(Arg)?AGT(Ser)c)AGC(Ser)?AGG(Arg)?AAG(Lys)ifSer≈Lysd)Intragenicsuppression(第二位點突變引起的基因內校正/密碼子間兩次錯義突變的互補)e.g.trp.A---UGG174----------GGA210---(w.t.)(lys)(Gly)backmutation(Cys)(Gly)----UGG174-----------GGA210--------UGG174----------GGA210--------UGC174-----------GAA210----活性結構無活性結構CA無活性結構(Lys)(Glu)如何採用簡單的遺傳學方法區別dNt的回復突變與intragenicmutation?!這種回復突變有時表現為高溫敏感型?!Intergenicsuppression—2(Su+)NonsensesuppressorMissensesuppressorIntergenicsuppression—2AGAUCUGlyArgGlyUCUUCUGGACCUGlyGlyIntergenicsuppresion-3(多聚體酶類構型的吻合)Subunit-1Subunit-2+ActiveformABB+InactiveformBackmutabActiveform7.4.基因重組交換的分子機制7.4.1.自然界的DNA分子均是重組體(recombinant)變異是生物進化的重要因素之一生物對環境的適應機制自然選擇的重要基礎可遺傳的變異;突變(點突變,染色體變異)頻率低,突變修復突變壓改變群體的基因頻率Pn=(1-P0)n遺傳重組交換染色體的自由組合染色單體間的交換分子克隆和轉基因技術(invitro)普遍發生自然界DNA分子均是重組體7.4.2.遺傳重組的類型a)HomologousRecombinationoccurbetweenHomo-chromosome/Homo-seq.sisternon-sisterchromatidstransformation,transductionconjugation
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