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G显带法用于X光医生染色体断裂点分布的研究

中国医学科学院放射医学研究所王芹

报告内容一、前言二、材料和方法三、结果四、讨论

一、前言在度量电离辐射所引起的生物机体量效关系和评估危害程度的方法中，染色体畸变分析应用最早、发展最为成熟，广泛应用于辐射效应研究。目前由于细胞遗传学研究手段的制约，通常只能对几个染色体进行分析，然后根据所得的结果外推至整个基因组，即必须假定所分析的染色体能够代表整个基因组，也就是说染色体断裂在整个基因组是随机分布的。G显带方法能较准确地对染色体各个畸变断裂点加以定位,判定染色体细微结构的变化。本文应用G显带方法对X光医生染色体畸变断裂点的分布进行了分析。

二、材料和方法1.实验对象X线组37人，均为男性，年龄范围38~67岁，平均55岁，平均放射工龄28年，参加工作的起始年限为1951~1979年。对照组10人，为相同医院中同时期、同性别、同年龄范围，但不接触X射线的医务人员。2.细胞培养和制片肝素抗凝的外周血接种在含15%小牛血清、适量抗生素和PHA的RPMI1640培养基中，置5%CO2培养50小时，终止培养前6小时加入终浓度为?g/ml秋水仙素。终止培养后用低渗处理15min，甲醇：冰醋酸（3:1）固定，制片。

二、材料和方法3.G-显带选择分散良好的中期相标本置60℃干燥箱干燥4小时，然后用含有EDTA的0.05%胰酶处理，Giemsa染色。4.畸变分析选择带型清楚和分散良好者镜下直接分析,每例分析100个中期相，有异常或怀疑有异常者显微摄影、剪贴、组型。5.统计处理分析标准按照国际命名体系测定断裂点的分布，预期值采用Morton提供的每条染色体的相对长度值计算，然后对数据进行χ2检验，分析观察值与预期值差异的显著性。

三、结果

表1X射线组染色体断裂点分布染色体号相对长度观察值预期值χ2P染色体号相对长度观察值预期值χ2P18.29811.781.21n.s133.4464.890.25n.s27.87711.181.56n.s143.37104.795.670.0536.72119.550.22n.s153.2564.620.41n.s46.2848.922.71n.s163.1124.421.33n.s55.9798.480.03n.s172.9244.150.01n.s65.66138.043.06n.s182.7113.852.11n.s75.30187.5314.560.05192.1503.063.06n.s84.7576.750.01n.s202.2713.231.54n.s94.48116.373.37n.s211.6222.300.04n.s104.6056.540.36n.s221.8022.560.12n.s114.5646.480.95n.sX5.2777.490.03n.s124.4366.300.01n.sY1.9222.730.20n.s??????合计1020142.82?

三、结果2.对照组分析10名对照人员G显带中期分裂细胞908个，共有断裂点17个，其分布见表2，未发现断裂点多发的染色体，统计学处理观察值和预期值无显著性差异(p0.05)。

表2对照组染色体断裂点分布染色体号相对长度观察值预期值χ2P染色体号相对长度观察值预期值χ2P18.2921.370.29n.s133.4410.570.32n.s27.8701.301.30n.s143.3710.560.35n.s36.7221.110.71n.s153.2500.540.54n.s46.2821.040.89n.s163.1100.510.52n.s55.9720.991.03n.s172.9200.480.48n.s65.6610.940.01n.s182.7100.450.45n.s75.3020.881.43n.s192.1500.360.36n.s84.7500.790.79n.s202.2700.380.38n.s94.4810.740.09n.s211.6200.270.27n.s104.6010.760.08n.s221.8000.300.30n.s114.5610.750.08n.sX5.2700.870.02n.s124.4300.730.73n.sY1.9210.320.32n.s??合计102.741717.0111.71?

四、讨论

四、讨论目前，辐射诱导的染色体畸变断裂点分布研究的结果还存在矛盾。有的学者认为，断裂点的分布是随机的，因此这方面研究还应进一步深入。在本研究中，从整体看，尽管染色体畸变的分布是非随机的，