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hn亚型禽流感分离鉴定;研究背景

研究目得与意义

研究技术路线

结果

结论;一、研究背景;临床剖检;肠道、胰腺出血;腺胃乳头出血;肾脏肿胀、出血;二、研究目得与意义;三、研究技术路线;1、病料得采集处理

2、病毒RNA得提取

3、病毒cDNA得获取

4、基因得RT-PCR扩增

5、电泳

;选取经PCR初步检测后得阳性病料,三次反复冻融后3000rpm离心5min,过滤后接种9-11日龄SPF鸡胚(0、2ml/枚)。

37℃下孵育72h,弃去24h内死胚,将24-72h内死亡和存活鸡胚置4℃,无菌收获尿囊液。;3、尿囊液检测;大家有疑问的，可以询问和交流;HA结果判定:;(2)接种鸡胚血凝抑制试验(HI)测定;HI结果判定:;(3)鸡胚尿囊液得RT-PCR测定;1、病料RT-PCR扩增结果;SPF鸡胚接种病料后得胚体病变;3、尿囊液检测结果;

其中加入NDV阳性血清得尿囊液能使鸡外周血红细胞全部发生凝集,反应呈阴性

加入H9N2阳性血清后,尿囊液能使部分鸡外周血红细胞发生凝集,反应呈阳性,HI为28;(3)尿囊液得RT-PCR测定