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[检测原理]流式细胞仪法2.仪器法网织红细胞计数仪血液分析仪法。荧光染料与网织红细胞中RNA结合,发出特定颜色的荧光进行RNA定量精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret%)。将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞比率(HFR、MFR、LFR)并计算网织红细胞其他参数。
第22页,共35页,星期日,2025年,2月5日血液分析仪法提供与网织红细胞相关的多个参数,网织红细胞绝对值、网织红细胞百分比、网织红细胞平均体积、网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数。第23页,共35页,星期日,2025年,2月5日*第24页,共35页,星期日,2025年,2月5日【质量保证】以手工计数法为重点。
1.染料选择第25页,共35页,星期日,2025年,2月5日第1页,共35页,星期日,2025年,2月5日1.常量法(Wintrobe法)和微量法(microhematocrit)将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。5层:血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。2.血液分析仪法由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出,Hct=红细胞计数×红细胞平均体积。检测原理第2页,共35页,星期日,2025年,2月5日第3页,共35页,星期日,2025年,2月5日*方法优点缺点温氏法无需特殊仪器,广泛应用不能完全排除残留血浆,且单独采血,用血量大微量法快速(5min)标本用量小、结果准确、重复性好。WHO推荐的首选参考方法有残留血浆,但较温氏法少电阻抗法简便快速(5-15s)白细胞、血小板增多可引起血液导电异常,使结果不可靠血细胞分析仪法简便快速、精密度高,无需单独采血准确性稍低,结果仅供参考第4页,共35页,星期日,2025年,2月5日1.操作规范化避免操作误差,如抗凝量不准,混匀不充分,离心速度不均等。2.注意干扰因素①假性增高:红细胞形态异常和红细胞增多时应注明,(细胞变形性减低和数量增多血浆残留量增加);高网织红细胞或高白细胞等②假性降低:体外溶血、自身凝集等。
质量保证第5页,共35页,星期日,2025年,2月5日参考值男性:0.380—0.508;女性:0.335—0.450第6页,共35页,星期日,2025年,2月5日临床意义HCT的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标,HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。第7页,共35页,星期日,2025年,2月5日临床意义1.临床补液量的参考各种原因导致脱水时,HCT都会增高,补液时可监测HCT,HCT恢复正常表示血容量得到纠正。2.真性红细胞增多症诊断指标当HCT大于0.7,RBC为(7-10)X1012/L,Hb大于180g/L,即可诊断。第8页,共35页,星期日,2025年,2月5日临床意义3.红细胞平均指数计算的基础数据红细胞平均值(MCV、MCHC)可用于贫血的形态学分类。4.血液流变学指标HCT增高表明红细胞数量偏高,全血黏度增加,严重者表现为高黏滞综合征,微循环障碍、组织缺氧。HCT与其他血液流变学指标联合应用,可对一些血栓前状态进行监测。
第9页,共35页,星期日,2025年,2月5日*任务五红细胞平均指数计算红细胞平均容积(meancorpuscularvolume,MCV),指每个红细胞平均体积的大小,以飞升(f1)为单位;红细胞血平均红蛋白含量(meancorpuscularhe-moglobin,MCH),指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克(pg)为单位;红细胞平均血红蛋白浓度
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