茅版第一章遗传的物质基础.ppt

*同工tRNA：一種氨基酸可能有多個密碼子，為了識別也就有多個tRNA，即多個tRNA代表一種氨基酸，這些tRNA稱為同工tRNA。校正tRNA：由校正基因突變產生，通過改變反密碼子區校正無義突變和錯義突變。*無義突變錯義突變**抑制突變的特點1.不是所有抑制基因都能產生有功能的蛋白質，關鍵是要看氨基酸取代的情況。2.校正的作用不可能是完全的。①校正tRNA分子必須和釋放因數或正常tRNA競爭；②無義突變的校正tRNA會抑制該基因3’端正常的終止密码，导致翻译通读，合成更长的蛋白质。③錯義突變的校正也可以使另一個基因錯誤翻譯。3.抑制基因的效率很低，通常為1-5%。*2、核糖體RNA(ribosomalRNA，rRNA)核糖體RNA占細胞中RNA總量的80%以上；幾種核糖体rRNA與幾十種蛋白質組成的亞細胞顆粒——核糖体是細胞內合成蛋白質的工廠；rRNA組成了核糖體的大部分，在原核生物核糖體中占2/3，在真核生物中占3/5；原核生物、真核生物细胞质和细胞器中的核糖体存在很大差异。*結合在內質網上的真核生物核糖體。左，電鏡下看到的胰腺細胞粗糙內質網；右，局部放大後的草圖。*C0t1/2：標準條件下（一般為0.18ml/L陽離子濃度）測得的複性率達1/2時的C0t值。該值與核苷酸對的複雜性成正比。對于原核生物，此值可代表基因组的大小及基因组中核苷酸对的复杂程度。真核基因組中因含有許多不同程度的重複序列(repetitivesequence)，所得到的Cot曲線更為複雜。**分子雜交（簡稱雜交，hybridization）是核酸研究中一項最基本的實驗技術。其基本原理就是應用核酸分子的變性和複性的性質，使來源不同的DNA（或RNA）片段，按堿基互補關係形成雜交雙鏈分子（heteroduplex）。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間，也可在RNA與DNA鏈之間形成。雜交的本质就是在一定条件下（加热或碱处理）使双螺旋解开成为单链,使互補核酸鏈實現複性。因此,變性技術也是核酸雜交的一個環節。5）核酸分子雜交：*原位雜交（insituhybridization）斑點雜交（dotblotting）Southernblotting--DNANorthernblotting--RNAWesternblotting—Protein雜交技術的種類***Southern*PCR技術(polymerasechainreaction)*內容回顧驗證核酸是遺傳物質的實驗DNA的結構和特徵二級結構：ＤＮＡ雙螺旋（要點）ＤＮＡ的構象：Ｂ-DNA,A-DNA,Z-DNA三級結構：原核生物真核生物DNA的性質變性和複性，Ｔｍ核酸雜交技術ＰＣＲ技術*6）DNA的檢測和測定分子量檢測：電泳品質或濃度檢測：EB染色分光光度技術:260nm光吸收化学检测放射性檢測*DNAElectrophoresis*HGP人類基因組計畫曼哈頓原子彈計畫阿波羅計畫*遺傳圖譜（geneticmap）又稱連鎖圖譜(linkagemap)，它是以具有遺傳多態性的遺傳標記為“路標”，以遺傳學距離（cM）為圖距的基因組圖。物理圖譜(physicalmap)是指特定的DNA片段在大片段DNA或基因組DNA中的位置關係和排列順序，包括DNA克隆片斷重疊群圖，大片段內切酶位點圖、DNA序列路標圖等.序列圖譜(sequencemap)是指基因組DNA中核苷酸的排列順序。轉錄圖譜(transcriptionmap)是在識別基因組所包含的蛋白質編碼序列的基礎上繪製的結合有關基因序列、位置及表達模式等資訊的圖譜。*VerysmallchangesintechnologyhavehadahugeimpactontheHGP….. Imaginewhatalargechange intechnologywoulddo…*CeleraGenomicsPublicConsortium*SequenceGenomesFindGenesEstablishFunctionandDiseaseMechanismGeneticMapping,MutationDetectionDrugCandidatesGeneTherapyDiagnostics/PrognosticsC