外周血单个核细胞(PBMC)全封闭自动化分离技术规范-征求意见稿.docx

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T/FDSAXXXX—XXXX外周血单个核细胞（PBMC）全封闭自动化分离技术规范

1范围

本文件规定了外周血单个核细胞（PBMC）全封闭自动化分离的原料、基本要求、设备及物料、工艺流程、质量控制。

本文件适用于全封闭自动化分离外周血单个核细胞（PBMC）的制备和存储操作。2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

外周血单个核细胞（PBMC）PeripheralBloodMononuclearCells外周血中具有单个核的细胞，主要包括淋巴细胞和单核细胞。

3.2

全密闭FullyEnclosed

从外周血采集开始到分离终产品存储到液氮中全流程无开放操作，即全过程密闭化。3.3

自动化Automation

除简单的设备启动、耗材安装与拆卸、无菌接管与热合等辅助操作以外，分离过程关键操作无需人员介入。

4原理

采用全封闭自动化细胞处理系统及一次性分离套件，基于Ficoll密度梯度离心原理，从新鲜外周血中分离出PBMC。通过自动化设备及软件程序控制，实现全密闭自动化分离-分装成适宜的规格，经程序降温后，在气相液氮中长期保存，以构建健康人PBMC细胞库，可用于后期细胞治疗产品制备、细胞功能研究。

5基本要求

5.1组织结构及职责

5.1.1应建立与PBMC生产相适应的管理机构，并有组织机构图。

5.1.2应设立独立的质量管理部门，履行质量保证和质量控制的职责。质量管理部门可以分别设立质量保证部门和质量控制部门。

5.1.3质量管理部门应当参与所有与质量有关的活动，负责审核所有与本文件有关的文件。

5.2人员要求

5.2.1应当配备足够数量并具有适当资质（含学历、培训和实践经验）的管理和操作人员，应当明确规定每个部门和每个岗位的职责。岗位职责不得遗漏，交叉的职责应当有明确规定。每个人所承担的职

责不应当过多。

5.2.2所有人员应当明确并理解自己的职责，熟悉与其职责相关的要求，并接受必要的培训，包括上岗前培训和继续培训。

5.2.3职责不应委托给他人。确需委托的，其职责可委托给具有相当资质的指定人员。

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5.3环境要求

5.3.1厂房的选址、设计、布局、建造、改造和维护应符合PBMC生产要求，应当能够最大限度地避免污染、交叉污染、混淆和差错，便于清洁、操作和维护。

5.3.2应当根据厂房及生产防护措施综合考虑选址，厂房所处的环境应当能够最大限度地降低物料或产品遭受污染的风险。

5.3.3应当有整洁的生产环境；厂区的地面、路面及运输等不应当对PBMC的生产造成污染；生产、行政、生活和辅助区的总体布局应当合理，不得互相妨碍；厂区和厂房内的人、物流走向应当合理。

5.3.4应当对厂房进行适当维护,并确保维修活动不影响PBMC的质量。应当按照详细的书面操作规程对厂房进行清洁或必要的消毒。

5.3.5厂房应当有适当的照明、温度、湿度和通风，确保生产和贮存的产品质量以及相关设备性能不会直接或间接地受到影响。

5.3.6厂房、设施的设计和安装应当能够有效防止昆虫或其它动物进入。应当采取必要的措施，避免所使用的灭鼠药、杀虫剂、烟熏剂等对设备、物料、产品造成污染。

5.3.7应当采取适当措施，防止未经批准人员的进入。生产、贮存和质量控制区不应当作为非本区工作人员的直接通道

6设备及物料

6.1设备

6.1.1一般要求

关键设备首次使用前应开展IQ、OQ和PQ的验证，确保设备性能满足使用要求。

6.1.2关键设备及性能

6.1.2.1全封闭自动化细胞处理系统

应至少满足：离心杯容量应≥300mL；180mL外周血回收PBMC数应≥1.5E8、完成全部操作时长≤75min、最小能满足1mL小体积分装能力；全流程应密闭化操作，并按照工艺特点设置相应取样接口。

6.1.2.2无菌接管机

一次性热熔片的使用及通过局部高温达到管路无菌连接；每年定期开展确认，如无菌接管机至少进行1次接管后压力和拉扯实验，以确认无菌接管效果。

6.1.2.3热合仪

每年至少进行1次热合后压力实验，以确认设备热合效果。6.1.2.4自动转液仪

能够全密闭实现瓶转袋操作。6.1.2.5细胞计数仪

宜使用AO/PI计数。6.1.2.6程序降温设备

使用程序降温仪或同等功能的程序降温盒。6.1.2.7气相液氮罐

长期低温保存PBMC。6.2关键物料

关键物料包括以下：

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a)细