平面色谱法 (2)学习课件.ppt

平面色譜法

(planechromatography) 在平面上進行分離的一種色譜方法，主要包括薄層色譜法和紙色譜法。紙色譜法薄層色譜法第一節平面色譜法的分類和原理分類薄層色譜法： 吸附薄層色譜法 分配薄層色譜法 分子排阻薄層色譜法紙色譜法:分配薄層電泳法平面色譜法參數定性參數相平衡參數面效參數分離參數定性參數1比移值(Rf值)溶質移動距離與流動相移動距離之比。（速度之比？） Rf=L/L0（定時展開）L為原點（origin）至斑點中心的距離，L0為原點至溶劑前沿（solventfront）的距離與組分及色譜條件有關定性參數2相對比移值(relativeRf；Rr)Rr=Rf(i)/Rf(s)=L(i)/L(s)與組分、色譜條件、參考物質有關。Rr值可以大於1，也可以小於1。重現性和可比性均比Rf值好，能消除系統誤差（參考物質與組分在完全相同的條件下展開）相平衡參數分配係數K=Cs/Cm容量因數k=CsVs/CmVmK、k與Rf值的關係：相平衡參數K、k與Rf值關係推導： (與定距展開比較) Rf=L/L0=u/u0=R’= R’為保留比第二節薄層色譜法

(thinlayerchromatography；TLC)固定相（吸附劑或載體）塗布成一均勻薄層，點樣，（密閉的容器中）展開，斑點顯色，（與對照物質）比較進行定性定量。特點：快，需十至幾十分鐘，同時展開多個試樣。試樣預處理簡單，對試樣限制少。載樣量比較大，適用於製備。儀器簡單，操作方便。分離能力較強。靈敏度較高。一、薄層色譜法的主要類型和原理吸附薄層色譜法原理：組分在薄層板上吸附、解吸附、 再吸附、再解吸附的過程。 吸附係數不等實現分離。一般極性強的組分K大，Rf值小；極性弱的組分K小，Rf值大。薄層色譜法的主要類型和原理分配薄層色譜法原理：多次分配的過程，分配係數（溶解度）不等實現分離分類：正相色譜、反相色譜薄層色譜法的主要類型和原理分配薄層色譜法正相色譜：水為固定相（矽膠載體），有機溶劑為流動相。 極性強的組分K大，Rf值小。反相色譜：烷基化學鍵合相為固定相，水－有機溶劑為流動相。 極性強的組分K小，Rf值大。二、吸附薄層色譜的吸附劑和展開劑吸附劑矽膠：多孔性微粒，表面帶有矽醇基，呈弱酸性。 原理：矽醇基(吸附中心)與極性基團形成氫鍵（吸附性）。 組分與矽醇基形成氫鍵（被吸附）的能力不同而分離。應用：酸性和中性物質的分離，如有機酸酚類、醛類等矽膠活度與含水量的關係：含水量高，活性級高，活度低。活化：加熱至100℃左右，除去吸附水提高 活度。（注意溫度不可過高）分離效率：與其粒度、孔徑及表面積等有關。常用矽膠：矽膠H，不含黏合劑矽膠G，含煆石膏矽膠GF254，含煆石膏和一種無機螢光劑，即錳啟動的矽酸鋅，在254nm紫外光下呈強烈黃綠色螢光背景。吸附劑氧化鋁鹼性氧化鋁(pH9.0)——分離中性或鹼性化合 物，如生物鹼、脂溶性維生素等；中性氧化鋁(pH7.5)——分離酸性及對堿不穩 定的化合物；酸性氧化鋁(pH4.0)——酸性化合物的分離。活度也與含水量有關。展開劑(流動相) 同吸附柱色譜 極性強的溶劑洗脫能力強 常用溶劑的極性強弱順序：水＞酸＞吡啶＞甲醇＞乙醇＞正丙醇＞丙酮＞乙酸乙酯＞乙醚＞氯仿＞二氯甲烷＞甲苯＞苯＞三氯乙烷＞四氯化碳環己烷石油醚。展開劑選擇原則：根據被分離物質的極性Stahl簡圖：極性物質—活度低（活性級大）的吸附劑--極性展開劑展開劑混合溶劑先用單一溶劑展開，若Rf值太小，則加入一定量極性強的溶劑，如乙醇、丙酮等，如果Rf值太大，則加入適量極性弱的溶劑(如環己烷、石油醚等)，以降低極性。可加入一定比例的酸或堿,使斑點集中。