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MM_FS_CNG_0266畜禽肉己烯雌酚高效液相色谱法
MM_FS_CNG_0266
畜禽肉中己烯雌酚的测定方法
1.适用范围
本方法适用于新鲜鸡肉、牛肉、猪肉、羊肉中己烯雌酚残留量测定。最小检出限1.25ng（取样5g时，最小检出浓度0.25mg／kg）。
2原理概要
样品匀浆后，经甲醇提取过滤，注入HPLC柱中，经紫外检测器鉴定。于波长230nm处测定吸光度同条件下绘制工作曲线，己烯雌酚含量与吸光度值在一定浓度范围内成正比，样品与工作曲线比较定量。
3主要试剂和仪器
甲醇；
0.043mol／L磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H2O）取1g磷酸二氢钠溶于水成500mL；
磷酸；
己烯雌酚（DES）标准溶液：精密称取100mg已烯雌酚（DES）溶于甲醇，移入100mL容量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，每毫升含DES1.0mg，贮于冰箱中；
DES贮备液，移入100mL容量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，每毫升含DES100μg。
高效液相色谱仪：具紫外检测器；
小型绞肉机；
小型粉碎机；
电动振荡机；
离心机。
称取5g（±μmFH滤膜，备用。
紫外检测器检测波长230nm；
灵敏度：0.04AUFS；
流动相：甲醇∶0.043mol／L磷酸二氢钠；70／30，用磷酸调pH＝5（其中NaH2PO4·2H2μm滤膜）；
流速：1mL／min；
进样量：20μL；
色谱柱：CLCODSC18（5μ×150mm不锈钢柱；
柱温：室温。
μμg／mL，按4.1处理方法提取备用。
分别取样20μL，注入HPLC柱中，可测得不同浓度DES标准溶液峰高，以DES浓度对峰高绘制工作曲线，同时取样液20μL，注入HPLC柱中，测得的峰高从工作曲线图中查相应含量，Rt＝8.235。
X＝
A×1000
m×
V2
V1
式中：X——样品中己烯雌酚含量，mg／kg；
A——进样体积中己烯雌酚含量，ng；
m——样品的质量，g；
V2——进样体积，μL；
V1——样品甲醇提取液总体积，mL。
2.718(1)
2.718(1)
4.34(2)
8.3(3)
（1）—溶剂峰；（2）—杂质峰；（3）—已烯雌酚标准品峰
6.来源：
—94
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