真核生物转录特点与加工.ppt

关于真核生物转录特点与加工第1页，共25页，星期日，2025年，2月5日转录因子与反式作用因子转录因子与反式作用因子:调节基因表达的蛋白为转录因子；它们与特异的顺式作用元件相互作用,并激活另一基因的转录第2页，共25页，星期日，2025年，2月5日TATATFIIDTFIIATFIIBRNA-polII/TFIIFTFIIEPIC12345转录起始复合物结合顺序第3页，共25页，星期日，2025年，2月5日转录后的加工原核RNA不需加工，边转录边翻译真核RNA需要加工rRNAtRNAmRNA5’加帽3’加尾剪接在转录过程中转录后进行第4页，共25页，星期日，2025年，2月5日真核生物转录后的加工意义：转录生成的前体RNA,无生物学活性,需加工变为成熟、有活性的RNA加工种类：剪切与剪接、末端添加核苷酸、修饰、RNA编辑第5页，共25页，星期日，2025年，2月5日?一、mRNA前体的加工（一）生成特点：原核：mRNA是多顺反子(polycistronic),每分子RNA中含几种蛋白质信息，RNA寿命短，转录没完时翻译即开始????例:乳糖操纵子，含Z,Y,A三个基因,分别编码半乳糖苷酶、透过酶及乙酰基转移酶

第6页，共25页，星期日，2025年，2月5日真核：单顺反子,一个mRNA仅编码一种蛋白质

???外显子:在真核生物基因中编码蛋白质的序列????内含子:非编码蛋白的序列,因其插于外显子之间又称插入序列,居间序列

????hnRNA:为mRNA的前体,转录物中外显子与内含子间隔排列，需经剪接加工后生成mRNA第7页，共25页，星期日，2025年，2月5日（二）mRNA前体加工过程真核：5‘末端帽子??部位：核内3‘端多聚A尾部位：核内,胞质有酶也可进行

???剪接作用??????????部位：胞核甲基化(甲基化发生在剪接之前,在非编码区分子中含1-2个m6A)RNA编辑(某些mRNA的核苷酸序列,在生成转录产物后还需插入、删除或取代一些核苷酸残基,方能生成具有正确翻译功能的模板,遗传信息在mRNA水平上的改变过程，称为RNA编辑)原核：多顺反子mRNA在RNaseⅢ作用下转变为单独的顺反子第8页，共25页，星期日，2025年，2月5日5’加帽pi5’pppG…磷酸酶ppi5’pG…pppG5’GpppG…甲基化酶＋CH3mGpppG…OHOH帽1帽0帽2NNNNOH2NCH3+OHHCH2HOPOPOPOPPPN1N2N3OOHOOHOOHOCH3OCH32OH79H甲基鸟苷5’，5’-三磷酸第9页，共25页，星期日，2025年，2月5日mRNA5`末端帽子特征的生物学功能：I:使mRNA免遭核酸酶的破坏，保持其结构的稳定性；II:利于蛋白质起始因子的识别，从而促进翻译的起始。第10页，共25页，星期日，2025年，2月5日3’加尾AAUAAAAAAAAAAAA……….加尾AATAAAGTGTGTG-----AAUAAAGUGUGUGAAUAAAGUGUGUG酶切转录的终止加尾信号GC丰富序列polyA尾（约20～200个A）AAAAAA第11页，共25页，星期日，2025年，2月5日高等真核生物（不包括酵母）的mRNA的共同特征：poly(A)添加位点上游11-30个核苷酸区域内存在高度保守的AAUAAA序列。绝大部分真核生物mRNA3`端含poly(A)尾巴poly(A)尾巴生物学功能：

I:保持mRNA的稳定性，防止被降解；

II:与翻译起始有关。第12页，共25页，星期日，2025年，2月5日应用一：★Poly(A用来从总RNA中分离mRNA第13页，共25页，星期日，2025年，2月5日可设计寡聚Oligo(dT)片段合成cDNA应用二：mRNA:5`NNNN…..NNNNNNAAA…AA3`TTT…TT5`cDNA:3`NNNN…..NNNNNNTTT…TT5`第14页，共25页，星期日，2025年，2月5日断裂基因：真核