血液及其成分的保存运输和领发.ppt

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**************************************************************第四节血液的冷冻保存七、冷冻血的特点和临床应用(一)优点冷冻血由于去除了细胞代谢产物、抗凝剂及可能的肝炎病毒,即使大量输注也可避免酸中毒、高钾血症以及减少肝炎的传播。由于去除了抗A抗B抗体,O型血真正成为万能供血者。第94页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存七、冷冻血的特点和临床应用(一)优点冷冻血的2,3-DPG含量与冷冻前区别不大,接近正常。输入人体后,氧的释放能力比常规方法保存血要好,可以立即纠正缺氧,这对于胸外科手术和新生儿换血有利。第95页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存七、冷冻血的特点和临床应用(二)缺点工艺较为繁琐,耗时较长,成本高。第96页,共98页,星期日,2025年,2月5日第97页,共98页,星期日,2025年,2月5日感谢大家观看第98页,共98页,星期日,2025年,2月5日******************************************************第四节血液的冷冻保存一、血细胞的低温损伤机制(三)化学损伤Levitt提出:冷冻时,在细胞脱水和溶质浓缩过程中,蛋白质组分异常靠近,最终使蛋白质分子中巯基(SH)和二硫键(SS)发生相互不可逆的反应,形成新的化学键,导致蛋白质变性而引起细胞死亡。第62页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存一、血细胞的低温损伤机制(四)细胞的融化反应细胞复融过程中的损伤:融化反应尚不明确第63页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存一、血细胞的低温损伤机制(四)细胞的融化反应经验总结:慢速冷冻的标本应慢速融化快速冷冻的标本则应采用快速融化的方法第64页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存二、冷冻保护剂冷冻保护剂可根据它们能否穿透细胞膜分为两种细胞内保护剂细胞外保护剂加入保护剂后,可降低溶液的冰点,并增加未冻水量小分子大分子能自由地通过细胞膜不能穿透细胞第65页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存二、冷冻保护剂胞内外盐数量一定未冻水量增加盐的浓度降低使细胞处于盐浓度较低的环境中第66页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存二、冷冻保护剂(二)冷冻保护剂的种类细胞内保护剂:甘油、DMSO、葡萄糖、乙二醇、丙三醇、甲醇、乙醇、乙酸胺、甲酞胺等。细胞外保护剂:乳糖、麦芽糖、木糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、右旋糖酐、白蛋白、羟乙基淀粉(HES)、聚乙二醇(PEG)、甘露醇等。第67页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存三、低温血液保存与玻璃化玻璃化就是生物材料在由液态向固态转化过程中没有相变热产生,也就是没有晶体生成。有人认为冷却速率达到10℃/秒,颗粒小于5~l0nm就不会使生物材料受到冷冻损伤,这就叫玻璃化。第68页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存三、低温血液保存与玻璃化添加冷冻保护剂或快速冷冻生物材料的目的就是使生物材料中的水处于容易达到玻璃化的状态。第69页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存四、红细胞甘油化、冷冻、融化和去甘油的方法高浓度甘油慢速冷冻低浓度甘油快速冷冻解冻:慢速融化去除甘油试剂可用糖液聚集法或不同浓度梯度氯化钠洗涤法解冻:快速融化去除甘油试剂可用不同浓度梯度氯化钠溶液,由高渗逐渐过渡到等渗分次洗涤第70页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存五、冷冻红细胞的制备方法在我国普遍使用高浓度甘油慢速冷冻第71页,共98页,星期日,2025年,2月5日第四节血液的冷冻保存五、冷冻红细胞的制备方法高浓度甘油慢速冷冻盐液离心洗涤法糖液聚集洗涤法按解冻后洗脱甘油的方法:方法:先采用高张溶液使融化的高渗红细胞渗透压达到平衡,接着用逐渐减低的高张溶液进行分次洗涤,最后用含有葡萄糖的等渗NaCl悬浮第72页,共98

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