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鸡蛋中溶菌酶的提取，纯化及纯度鉴定

李莹姝蒋华云*

（南京师范大学生命科学学院，南京210046）

摘要：从蛋清中用724弱酸性阳离子交换树脂提取溶菌酶，然后用硫酸铵溶液洗脱，盐析得到溶菌

酶。用葡聚糖凝胶层析（SephadexG-75）纯化溶菌酶，收集峰值处样品。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶

（SDS）电泳鉴定个步骤留样及所得溶菌酶样品的纯度。溶菌酶得率为0.0474mg/100ml

（0.03g/kg）；葡聚糖凝胶层析过程纯化样品得到了洗脱峰曲线，但未能收集到峰值处样品；电泳

结果显示在纯化过程中溶菌酶纯度不断升高。本实验溶菌酶得率较低，提取工艺有待改进，需进一

步减少样品损失；层析过程需进一步熟练掌握，以更好达到纯化效果。

关键词：溶菌酶；离子交换树脂，凝胶层析；SDS

Extraction,purificationandpurityofEgglysozyme

YingsLiHuayJiang*

(CollegeofLifeScience,NanjingNormalUniversity,Nanjing210046,China)

Abstract:Fromeggwhite,with724weakacidcationexchangeresinextractionoflysozyme,

andthenelutedwithammoniumsulfate,saltingtobelysozyme.Withdextrangel

chromatography(SephadexG-75)purifiedlysozyme,thepeakofthesamplecollection.By

SDS-polyacrylamidegel(SDS)electrophoresisandidentifiedstepstostaykindof

purityofthesamplesfromlysozyme.Lysozymeyield0.0474mg/100ml(0.03g/kg);dextran

gelchromatographypurifiedsamplesobtainedduringelutionpeakcurve,butfailedto

collectsamplesatthepeak;electrophoresisshowedthatthepurificationprocessof

lysozymeenzymepurityrising.Inthisstudy,lysozymewasthelowrateofextraction

processcouldbeimproved,theneedtofurtherreducesamplelosses;chromatographyprocess

needsfurtherproficiencyinordertobetterachievepurification.

Keywords:lysozyme,Ionexchangeresin,Gelchromatography,SDS

溶菌酶(Lysozyme,1,4－β－N－溶菌酶)是一种专门作用于革兰氏阳性菌细胞壁中肽聚糖

的β-1,4-糖苷键的水解酶,因而又称为胞壁质酶或者N-胞壁质聚糖水解酶。溶菌酶在临床上是

有效的消炎剂,在食品防腐和基因工程等方面也有广泛的应用。[1][2]

溶菌酶来源广泛,人、动物、植物和微生物中均有发现,其中鸡蛋清中含量较高,因此,工业

生产溶菌酶常以鸡。蛋清为原料鸡蛋清的溶菌酶是研究得最清楚的一种溶菌酶[3]，其化学性质稳

定，纯品为白色或微黄色结晶体，易溶于水，不溶于丙酮、乙醇，是一种分子量在14～15kD，等

电点pH值在11.0左右，最适效应温度在50℃，最适pH值为6.0～7.0的碱性球蛋白。它的生

物化学功能是催化某些细菌细胞壁多糖的水解，从而溶解这些细菌的细胞壁。溶菌酶的抗菌及抗病

毒活力与pH值有关，在酸性介质中，活力显著增强。当前,溶菌酶的制备有多种方法，最常用的

是离子交换树脂吸附法[4]。