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第1课时微生物的基本培育技术

课标内容要求

核心素养对接

1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培育物的前提。

2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。

3.概述平板划线法和稀释涂布平板法是试验室进行微生物分别和纯化的常用方法。

1.科学思维:依据微生物的代谢类型分析培育基的组成;比较消毒和灭菌方法的不同。

2.科学探究:探讨并驾驭无菌技术的试验操作方法;探讨并驾驭微生物的纯培育的方法。

一、培育基的配制

1.培育基

人们依据微生物对养分物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的养分基质——培育基,用以培育、分别、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。

2.培育基的种类

eq\a\vs4\al(按物理,性质分类)eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(液体培育基:不含凝固剂、呈液体状态的培育基,↓(加入凝固剂,如琼脂),固体培育基:呈固体状态的培育基))

3.培育基的养分组成

各种培育基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等养分物质,此外还须要满意微生物生长对pH、特别养分物质以及O2的需求。

4.培育基特别需求

(1)培育乳酸杆菌时,在培育基中添加维生素。

(2)培育霉菌时,将培育基调至酸性。

(3)培育细菌时,将培育基调至中性或弱碱性。

(4)培育厌氧微生物时,须要供应无氧的条件。

二、无菌技术

1.无菌技术关键:防止杂菌污染。

2.消毒与灭菌

(1)概念

①消毒:运用较为温柔的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。

②灭菌:运用剧烈的理化方法杀死物体内外全部的微生物(包括芽孢和孢子)。

(2)类型与方法

连一连:将无菌技术类型、常用方法和适用对象用线连起来。

提示:

3.详细操作

(1)对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。

(2)将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等进行灭菌。

(3)为避开四周环境中微生物的污染,试验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰旁边进行。

(4)试验操作时应避开已经灭菌处理的材料用具与四周的物品接触。

三、微生物的纯培育

1.微生物纯培育的概念:由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培育物,获得纯培育物的过程就是纯培育。

2.微生物纯培育的步骤:微生物的纯培育包括配制培育基、灭菌、接种、分别和培育等步骤。

3.酵母菌的纯培育

(1)菌落:分散的微生物在相宜的固体培育基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有肯定形态结构的子细胞群体。

(2)纯培育的原理:设法在培育基上得到由单个微生物繁殖形成的纯培育物(单菌落)。

(3)纯培育方法:平板划线法和稀释涂布平板法。

(4)酵母菌的纯培育步骤

推断对错(正确的打“√”,错误的打“×”)

1.液体培育基含有水,而固体培育基不含水。 (×)

提示:液体培育基和固体培育基都含有水,它们的区分为是否含有凝固剂。

2.获得纯净微生物培育物的关键是防止杂菌污染。 (√)

3.用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基都要进行消毒。 (×)

提示:用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基都要进行灭菌。

4.培育基分装到培育皿后进行灭菌。 (×)

提示:培育基分装到培育皿之前要进行灭菌。

5.平板冷凝后应将平板倒置,防止皿盖上的冷凝水落入培育基,造成污染。 (√)

6.转换划线角度后须要灼烧接种环再进行划线。 (√)

制备培育基

1.培育基的配制原则

(1)目的要明确:不同的微生物需求不同,依据培育目的进行配制。

(2)养分要协调:养分物质的浓度和比例要相宜。

(3)pH要相宜:为维持pH的相对恒定,可在培育基中加入缓冲剂,常用K2HPO4-KH2PO4。

2.培育基的成分及功能

养分物质

作用

功能

主要来源

碳源

能为微生物代谢供应碳元素

构成生物体的细胞物质和一些代谢产物,有些是异养生物的能源物质

无机碳源:CO2、NaHCO3等;有机碳源:糖类、脂质、蛋白质、有机酸等

氮源

能为微生物的代谢供应氮元素

合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物

无机化合物:N2、NH3、铵盐、硝酸盐等;有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨等

生长因子

微生物生长不行缺少的微量有机物

酶和核酸的组成成分;参加代谢过程中的酶促反应

维生素、氨基酸、碱基等

是生命活动所必需的

不仅是优良的溶剂,而且可维持生物大分子结构的稳定

外界摄入

无机盐

为微生物供应除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量元素

细胞内的组成成分,生理调整物质,某些化能自养菌的能源,酶的激活剂

无机化合物

1.能够利用无机碳源的微生物的同化作用类型是什么?

提示:能利用无机碳源的微生物的同化作用类型是自养型微生物。

2.牛肉膏蛋白胨培育基是一种常见的细菌培育基,其中牛肉膏、蛋白胨能够供应哪些养分成分?

提示:牛肉膏、蛋白胨能够供

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