大肠杆菌概述教学课件.pptVIP

1、ETEC疫苗〔2〕DNA疫苗〔1〕载体疫苗2、EHEC疫苗〔1〕多糖结合疫苗〔2〕亚单位疫苗3、转基因植物疫苗4、细菌ghost疫苗研究进展载体疫苗多为口服活菌苗,是利用微生物〔载体菌多为志贺菌和沙门氏菌〕作载体,将保护性抗原基因重组到质粒上,通过平衡致死系统使其稳定存在于微生物中,或重组到微生物染色体的特定位置上,表达保护性抗原。DNA疫苗直接将含编码外源蛋白抗原基因的质粒DNA导人机体组织中表达,被提呈的表达产物,与主要组织相容性复合物(MHC)结合,刺激机体产生相应的抗体和细胞毒性T淋巴细胞(cLTs),分别介导体液免疫和细胞免疫应答,即DNA疫苗。2005年，Piller等开展了表达大肠杆菌K99fmabriae的转基因大豆，小鼠口服后能产生抗原特异的高水平抗体和CD4+T淋巴细胞。目前的研究重点在于开发出一种能生吃的植物如水果，并且尽量提高蛋白的表达量。现在有人将ETEC的LTB或者霍乱弧菌的CTB基因转入番茄植物中，虽然香蕉是最理想的植物疫苗对象，但是还有待于技术上的突破。第三十一页，共五十二页。大肠杆菌生物制品使用现状目前常见的主要有仔猪、禽、羊、兔的各类大肠杆菌疫苗。第三十二页，共五十二页。各种动物大肠杆菌疫苗仔猪大肠杆菌疫苗禽大肠杆菌病疫苗兔大肠杆菌病疫苗羊大肠杆菌病疫苗等等第三十三页，共五十二页。仔猪疫苗多为仔猪大肠杆菌病三价灭活疫苗仔猪常用疫苗第三十四页，共五十二页。例如：仔猪大肠杆菌基因工程K88—ST1—LTB三价灭活疫苗，由辽宁省益康生物制品厂生产。接种对象：仔猪使用方法：颈侧肌肉注射，每次间隔7天,三次免疫量分别为5mL、１0mL、20mL；第2次和第3次免疫应分点注射。效果：仔猪大肠杆菌疫苗常用：仔猪大肠杆菌基因工程K88—ST1—LTB三价灭活疫苗仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41四价亚单位疫苗仔猪大肠杆菌病三价蜂胶灭活疫苗（主）第三十五页，共五十二页。禽大肠杆菌病疫苗〔一〕灭活疫苗：1、灭活蜂胶苗2、灭活油乳剂苗3、灭活铝胶苗〔二〕亚单位疫苗〔三〕弱毒疫苗1、菌毛亚单位疫苗2、荚膜亚单位疫苗O2(NorrChls)、O78(ChlsNorr)单价弱毒苗、第三十六页，共五十二页。以鸡大肠杆菌病灭活疫苗制备为例：1、菌种病原性大肠杆菌EC24、EC30、EC45、EC50、EC44麦康凯氏培养基培养2、制造要点(1)、种子繁殖：马丁肉汤培养-划线接种麦康凯氏培养基培养-接种马丁琼脂斜面培养-作为一级种子-取一级种子接种马丁肉汤培养-得到二级种子。(2)、菌液制备：用玻璃瓶或培养罐通气培养，按容积装入70%培养基及花生油消泡剂。(3)、配苗与封装：配苗：每5份菌液加1份氢氧化铝胶，同时按总量的0.005%加硫柳汞，充分震荡，2～8℃静置，抽弃上清液浓缩成全量的60%。封装：检验合格，混合分装3、质量标准(1)、平安检验(2)、效力检验4、保存与使用保存：2～8℃保存，为期1a。使用：颈背侧皮下注射0.5ml,1月龄鸡接种对象：1月龄鸡以上的鸡免疫期为4个月第三十七页，共五十二页。附：禽大肠杆菌病第三十八页，共五十二页。禽大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌的某些血清型所引起的一类疾病的总称。包括心包炎、脐炎、卵巢炎、输卵管炎、肠炎或慢性肿瘤样肉芽肿等。第三十九页，共五十二页。兽医生物制品学-分论大肠杆菌小组成员：余兆鸿罗洪瑶胡国帅黄荣浩第一页，共五十二页。第一章大肠杆菌大肠杆菌是革兰氏阴性杆菌。多数是肠道的正常菌群，少数为病原菌。第二页，共五十二页。埃希菌属〔Escherichia)埃希菌属有5个种，其中最重要的是大肠埃希菌俗称大肠杆菌〔E.coli)，是最常见的临床别离菌。第三页，共五十二页。形态特征：大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的直杆菌，大小0.4～0.7umx2～3um，两端钝圆，散在或成对，大多数菌株周生鞭毛，但也有无鞭毛或丧失鞭毛的变异株。原子力显微镜图片第四页，共五十二页。第五页，共五十二页。第六页，共五十二页。染色特性：碱性染料对本菌有良好着色性，革兰氏染色法被染成红色。第七页，共五十二页。培养及生化特性：本菌为兼性厌氧菌，在普通肉汤培养基上生长良好，最适生长温度为37℃，最适生长pH为7.2～7.4。123第八页，共五十二页。