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215固定化培养(了解)采用的固定化反应器有网状多孔板、尼龙网套和中孔纤维膜等多种类型。有利于细胞组织化;4易于维持细胞间物理化学梯度;3优点(1)细胞位置固定,易于获得高密度细胞群体;6易于控制培养条件及获得较高含量的次级代谢产物。思考题一、选择1.植物组织培养过程中,获得外植体后,通常首先要进行灭菌,特别使用于草本植物和柔软组织的灭菌剂是——A.次氯酸钙B.次氯酸钠C.氯化汞D.无水乙醇2.植物细胞的培养基中常需要加入无机盐,下列——属于大量元素。A.N、S、P、Mg、CuB.N、S、K、Zn、ClC.N、S、Na、Mg、FeD.N、S、P、Ca、Na3、植物细胞培养基中常需要加入——维生素。A.A族B.B族C.C族D.D族4.植物细胞培养中有些研究必须在固体培养基上进行,最常用的固化剂是——A.明胶B.淀粉C.琼脂D.硅胶5.最适合植物细胞培养的生物反应器是——A.机械搅拌式B.气升式C.转鼓式D.鼓泡塔式6.植物细胞培养应用最广泛的培养基是——A.MEM培养基B.DMEN培养基C.BME培养基D.MS培养基二、填空1.植物细胞培养的最适温度是——,光照以每天——为宜。2.日本科学家成功开发的第一个植物细胞工程商品是——。三、名词解释成批培养连续培养第五节影响植物次级代谢产物积累的因素在植物组织培养过程中,影响植物次级代谢产物产生和累计的因素有:生物条件:如外植体、季节、休眠等物理条件:如温度、光、通气等化学条件:如无机盐、碳源、维生素等工业培养条件:如培养罐类型、通气等0103020405一、外植体的选择(了解)不同外植体的悬浮细胞,其最大次级代谢的积累时间各异。二、培养条件的影响1.培养环境的内在因素(1)接种和诱导:次级代谢产物的产率与外植体大小、细胞密度及营养成分密切相关。(2)培养基的组成——物质基础①P:缺乏磷或较低的含磷量都会导致生物量下降或次级代谢产物积累。②N:两种主要氮源,即NO3和NH4细胞的生产能力通常取决于NO3和NH4之比。③Cu:必要元素第五章植物细胞工程制药本章重点:植物细胞培养的基本概念;植物细胞的生理特征;植物细胞培养的基本技术。第一节基本概念植物细胞工程涉及很多基本理论和实际操作技术,如组织和细胞培养技术,它是细胞遗传操作及细胞保藏的基础。1.植物细胞的全能性:植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息,从而具备发育成完整植株的遗传能力。在适宜条件下,任何一个细胞都可以发育成一个新个体。植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础。易混淆的概念植物的分化:指在个体发育中,相同细胞后代在形态、结构、生理功能上产生稳定性差异的过程。(细胞分裂是细胞分化的基础,生物体的生长发育是细胞分裂和细胞分化共同作用的结果。)脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化。再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根和芽等器官,这个过程叫做再分化。植物组织培养过程总结离体的植物器官、组织或细胞(外植体)愈伤组织根、芽植物体脱分化再分化补充:愈伤组织的形成愈伤组织:在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞(细胞排列疏松、无规则)。植物组织或器官的无菌培养定义:指在无菌或人工控制条件下(培养基、光照、温度),研究植物的细胞、组织和器官以及控制其生长发育的技术。主要技术有:(1)幼苗及较大植株的培养;从植物体的各种组织、器官等外植体,经脱分化而形成的细胞聚集体的培养;保持良好分散性的单细胞和较小细胞团的液体培养;植物离体器官的培养;未成熟或成熟的胚胎的离体培养。植物组织培养过程切取外植体:从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官外植体灭菌消毒(根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等)用消毒过的器械将外植体置于培养皿上切取所需的外植体将外植体接种于培养容器的培养基上整个试验在超净工作台上进行,保持无菌!外植体经过一段时间在培养基上生长后,会形成愈伤组织次级代谢产物定义:指生物体生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、对该生物体无明显生理功能,或并非是生物体生长和繁殖所必需的物质,如抗生素、毒素、激素、色素等。特征:(1)有明显的分类学区域界限;其生物合成需在一定的条件下才能发生;缺乏明确的生理功能;是生命活动的多余成分。了解内容1分生组织培养:指在人工培养基上培养茎端分生组织
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