植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定.pptVIP

植物组织逆境伤害程度的测定——电导法（-20oC,20min冷冻材料）学生进入实验室先洗试管电导法:02紫外法：根据渗出物质对紫外的吸收01逆境伤害程度的测定方法：植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。A逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨B当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，如植物组织浸入无离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。C电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。D一、实验原理：膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。二、实验材料：大叶黄杨叶片材料处理：正常植物叶片20℃冷冻胁迫处理，处理20min。洗刷试管：01材料处理电导率测定整理数据,结果计算(课后算)02三、操作步骤程序：三、操作步骤程序：1、洗刷试管：试管刷沾洗涤液刷一遍自来水3—4遍冲净去离子水冲1遍去离子水中含有吐温-20（洗用会出现泡沫）吐温作用：阴离子表面活性剂，促进水分与叶片表面接触。吐温20－聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸酯2、材料处理操作：正常、冻害各取3个叶片，洗净各打取叶圆片27个以上,放到小烧杯中用去离子水冲洗每支试管9个叶圆片,加15ml蒸馏水塑料纱网用去离子水漂洗一下，放入试管(距液面1-2cm)抽气15min(不盖塞)，取出纱网抽气作用？纱网作用?防止抽气时叶圆片被抽出。防止高CO2气源和口中呼出的CO2进入试管放置到塑料烧杯中(不盖塞子)，统一抽气10～15min。（设置空白1只试管）3、电导率测定：抽气后材料室温摇动20min，测定初电导值S1(设一空白)沸水浴10min杀死组织，自来水冷却用力摇1-2min后，测定终电导S2DDS-307型电导率仪操作规程①打开预热30min②仪器校准：将“选择”旋钮指向“检查”档，调节常数补偿旋钮到“1”刻度线，调节温度补偿旋钮到“25”刻度线，然后调节“校准”旋钮，使仪器显示100.0μS/cm，校准完毕③样品测定：将“选择”旋钮于适合的量程，测定样品。当测定时显示值熄灭时，说明测量值超出量程范围，应将选择旋钮置于高一档量程按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致测定时电极完全浸没到溶液中。如果试管口小，电极不能全部浸没，可全部试管加去离子水至20ml每测一个样品，用去离子水冲洗电极，滤纸吸干电极表面水份，再测下个样品