DB36T-灵芝菌种生产技术规程.docVIP

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FORMTEXT灵芝菌种生产技术规程

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目??次

TOC\h\z\t前言、引言标题,1,参考文献、索引标题,1,章标题,1,参考文献,1,附录标识,1,一级条标题,3前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4场地环境 2

5设施设备 2

6生产技术 2

7菌种生产档案 4

8标识、包装、运输及贮存 4

前??言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由江西省农业农村厅提出。

本标准起草单位：江西省农业科学院农业应用微生物研究所。

本标准主要起草人：胡佳、魏云辉、戴丹、彭新红、孙鹏、陈绪涛、王振、熊泽亚、李菁。

灵芝菌种生产技术规程

范围

本标准规定了灵芝菌种生产的范围、规范性引用文件、术语和定义、场地环境、设施设备、生产技术、菌种生产档案、标识、包装、运输及贮存。

本标准适用于工厂化生产企业或专业合作社生产灵芝母种、原种和栽培种。

规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T191包装储运图示标志

GB5749生活饮用水卫生标准

GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则

GB/T12728食用菌术语

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

NY/T1276农药安全使用规范总则

食用菌菌种管理办法（中华人民共和国农业部令第62号）

术语和定义

GB/T12728中确定的术语和定义适用于本文件。

菌种

生长在适宜基质上具结实性的菌丝培养物。包括母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种

（三级种）。

母种

经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物。也称为一级种。

原种

由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。也称为二级种。

栽培种

由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。栽培种只能用于栽培，不可再次扩大繁殖菌种。也称为三级种。

场地环境

生产场地选择

选择地势平坦、排灌方便、土壤肥沃、通风良好的场所作为生产场地。要求周边环境清洁，无生活垃圾堆放和填埋场，无工业固体废弃物、危险废弃物堆放和填埋场等。生产场地应符合NY/T528的规定。

生产用水

生产用水应符合GB5749的规定。

设施设备

基本设施

具备配料室、装袋室、灭菌室、接种室、培养室（通风好，有纱窗）、贮藏室等设施。

基本设备

粉碎机、磅秤、天平、高压灭菌锅或常压灭菌锅、操作台、超净工作台或接种箱、空调、除湿机、培养架、恒温培养箱、冰箱、显微镜等。生产量大的菌种厂还应配备搅拌机、装袋机。

生产技术

母种生产

6.1.1培养基

PDA培养基：称取200g马铃薯切成小块加1000ml水煮沸20～30min，纱布过滤取滤液定容至1000ml，加入20g葡萄糖和15～20g琼脂粉。

6.1.2分装和灭菌

将配制好的PDA培养基分装至Φ18mm×180mm或Φ20mm×200mm的玻璃试管中，装量为试管长度的1/3左右。试管口应保持干净，分装后塞入棉塞或硅胶塞，并用牛皮纸包扎。包扎好的直立放在高压灭菌锅内高压蒸汽灭菌，121℃保持20～30min。

6.1.3制作斜面

灭菌后的试管冷却至60℃左右，将试管倾斜摆放在操作台桌面上，试管口比试管底部高1.0～1.5cm，做成培养基斜面，斜面长度约为试管长度的2/3。

6.1.4无菌检测

随机抽取3%～5%的试管斜面，在30℃下培养24～48h，检查有无微生物菌落，无菌落的为合格。

6.1.5接种

在超净工作台或接种箱内接种，接种前用紫