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*************************************生物分析技术简介技术类别主要技术方法典型应用分子结构分析质谱(MS)、核磁共振(NMR)、X射线晶体学蛋白质结构解析、代谢物鉴定、药物靶点分析生物分子分离电泳、液相色谱、毛细管电泳、场流分离蛋白质组分离、核酸纯化、生物标志物分析分子相互作用分析表面等离子体共振(SPR)、等温滴定量热法(ITC)、双杂交系统蛋白质-蛋白质相互作用、药物-靶点结合研究基因组学PCR、DNA测序、基因芯片、基因编辑技术基因表达分析、基因突变检测、遗传疾病诊断蛋白质组学二维电泳、质谱、蛋白芯片、蛋白质组测序蛋白质表达谱分析、翻译后修饰研究免疫分析ELISA、西方印迹、免疫组织化学、流式细胞术抗原抗体检测、免疫细胞表型分析、临床诊断生物分析技术是研究生物样品中分子组分和生命现象的专业分析方法体系，集合了现代分析化学、分子生物学和生物物理学的多种先进技术。生物分析技术面临的主要挑战包括生物样品复杂性、易变性和有限性，以及生物分子本身的多样性和复杂结构。现代生物分析正向高通量、高灵敏度、高特异性和自动化方向发展。单细胞分析、原位分析和实时分析技术使研究生命个体差异和动态过程成为可能。生物传感器和便携式分析设备的发展使即时检测和个体化医疗监测成为现实。综合运用多种生物分析技术，已成为生命科学研究和生物医学应用的必要手段。聚合酶链反应技术DNA变性95℃高温使双链DNA解链为单链，通常持续30-60秒引物退火50-65℃温度下特异性引物与单链DNA配对，通常持续20-40秒DNA延伸72℃温度下DNA聚合酶合成新链，通常每分钟合成约1000个碱基循环扩增重复上述步骤25-40次，目标DNA片段数量呈指数增长聚合酶链反应(PCR)是一种体外DNA扩增技术，能够将微量DNA快速扩增至可检测水平。PCR关键组分包括DNA模板、特异性引物对、耐热DNA聚合酶(通常为Taq聚合酶)、脱氧核苷三磷酸(dNTPs)和含镁离子的缓冲液。PCR成功的关键在于引物设计、反应条件优化和污染控制。PCR技术已发展出多种变体:定量PCR(qPCR)通过荧光信号实时监测DNA扩增过程；数字PCR(dPCR)将样品分成数千个独立反应，实现绝对定量；多重PCR在一个反应中同时扩增多个目标序列；巢式PCR通过两轮扩增提高特异性；逆转录PCR(RT-PCR)可分析RNA表达。PCR广泛应用于分子诊断、基因克隆、遗传变异分析、法医鉴定和微生物检测等领域，是现代生物技术的基石。酶联免疫吸附测定基本原理与类型酶联免疫吸附测定(ELISA)基于特异性抗原-抗体反应和酶促显色反应，是一种高灵敏度的免疫分析技术。主要类型包括:直接法:样品抗原直接吸附于固相，加入酶标记抗体结合检测间接法:固相抗原结合样品抗体，再用酶标记的二抗检测夹心法:先用捕获抗体包被固相，捕获样品抗原，再用酶标记检测抗体识别竞争法:样品抗原与酶标记抗原竞争有限的抗体结合位点直接法操作简单但灵敏度较低；间接法灵敏度高但背景可能较高；夹心法特异性和灵敏度最高，适合大分子抗原；竞争法适合小分子抗原检测。技术优势与应用ELISA具有灵敏度高(可达pg/mL级)、特异性强、操作简便和可高通量筛选等优点。主要应用领域包括:临床诊断:激素水平测定、肿瘤标志物检测、感染性疾病筛查食品安全:农药残留、兽药残留、病原微生物和毒素检测环境监测:环境污染物和生物毒素检测科学研究:细胞因子水平测定、蛋白质表达分析药物研发:药效学评价、抗体筛选、生物药定量目前ELISA技术已发展出化学发光底物系统、时间分辨荧光测定、电化学ELISA和微流控芯片ELISA等新型方法，进一步提高了检测灵敏度和通量。ELISA是现代实验室最常用的免疫分析方法之一，在多种领域发挥着重要作用。近年来，多重ELISA技术允许在单个孔中同时检测多种靶标，大大提高了分析效率。流式细胞术样品制备与标记细胞悬液制备与荧光标记，常用荧光抗体和核酸染料流体动力学聚焦鞘液将细胞流形成单细胞流，通过激光照射区光信号检测与分析收集散射光和荧光信号，分析细胞特性流式细胞术(FCM)是一种快速分析和分选单个细胞的强大技术，能够同时测量多个细胞参数。前向散射光(FSC)反映细胞大小，侧向散射光(SSC)反映细胞内部复杂性和颗粒度，而荧光信号则提供细胞表面抗原、细胞内组分和功能状态等信息。现代流式细胞仪可配备多个激光器和检测器，实现15-30个参数的同时检测。荧光激活细胞分选(FACS)技术在细胞分析基础上，能够根据预设参数对特定细胞进行物理分选，纯度可达