遗传的物质基础.ppt

反向重复序列回文序列（palindrome）形成发夹结构，十字形结构，是限制酶的酶切位点。第23页，共54页，星期日，2025年，2月5日A-DNA相对湿度75％以下，右手双螺旋，双链反向平行，每周螺旋10.9对碱基，螺距0.26nm，碱基平面不与螺旋轴垂直，大沟极深五、DNA双螺旋结构的基本形式第24页，共54页，星期日，2025年，2月5日B－DNA天然状态DNA，相对湿度92％。右手双螺旋，每周螺旋10对碱基(10.4)，螺距3.4nm，碱基平面与螺旋轴垂直，大沟宽而深。第25页，共54页，星期日，2025年，2月5日Z－DNA左手双螺旋，每圈螺旋12对碱基，螺距4.6nm，碱基平面与螺旋轴不垂直，无大沟，小沟深而窄第26页，共54页，星期日，2025年，2月5日其他形式四链DNA第27页，共54页，星期日，2025年，2月5日三链DNA一条DNA链为全嘌呤，另一条链为全嘧啶的区段产生，结果一条嘌呤链和两条嘧啶链构成，H-DNA.与DNA的复制可能有关。第28页，共54页，星期日，2025年，2月5日一条嘌呤和两条嘧啶链构成，(YR*Y)CG*C，TA*T星号左边的碱基正常配对，右边的碱基异常配对第29页，共54页，星期日，2025年，2月5日或两条嘌呤和一条嘧啶链构成(YR*R)CG*G，TA*A，CG*A。GGGACAATC第30页，共54页，星期日，2025年，2月5日六、DNA的变性和复性变性：热，试剂，氢键、碱基堆积力破坏，DNA由双链变成单链温度：80～100℃变性剂：尿素，甲酰胺增色效应（hyperchromicity）正常双链（50μg/ml）A260=1.00完全变性的单链DNAA260=1.37单核苷酸A260=1.60DNA双螺旋结构失去一半时，A260=1.185第31页，共54页，星期日，2025年，2月5日Tm值的影响因素：DNA的均一性均一性高，Tm值的范围小G-C含量G-C含量高，Tm值高经验公式G-C%=(Tm-69.3)×2.44介质中的离子强度低离子强度易熔解变性DNA保存在高浓度缓冲液中防变性（TE）第32页，共54页，星期日，2025年，2月5日复性单链重新缔合为双螺旋的过程，一般比Tm低20～25℃下进行复性过程：复性时溶液中单链DNA随机碰撞。GC先配对形成短的双链，然后配对区域延伸，象拉链一样复性产生的不一定是原有的互补链，非原配第33页，共54页，星期日，2025年，2月5日影响DNA复性的因素：DNA复杂性简单序列复性快DNA浓度高浓度复性快DNA片断片断小复性快，移动碰撞机会多温度过低温度减少互补链的碰撞机会盐浓度过低盐浓度使复性后的DNA又变性第34页，共54页，星期日，2025年，2月5日杂交：不同来源的单链核酸经碱基互补配对而形成的双螺旋，DNA-DNA,DNA-RNADNA杂交可反映不同生物中DNA的共同序列和不同序列，研究生物的进化，核酸杂交是现代分子生物学的基础第35页，共54页，星期日，2025年，2月5日液相杂交第36页，共54页，星期日，2025年，2月5日滤膜杂交第37页，共54页，星期日，2025年，2月5日Cot曲线DNA复性时的单链消失的速度1C/Co=――――1+KCotC：单链DNA浓度，Co：DNA总浓度，t：时间秒，k：=二级反应常数复性的分数C/Co是起始浓度和经过时间的乘积（Cot）的函数。第38页，共54页，星期日，2025年，2月5日第1页，共54页，星期日，2025年，2月5日教学目的：学习分子遗传学的基本理论，重点是遗传物质在分子水平上的遗传信息流向和基因表达调控。利用分子遗传学的基本理论指导相关科研工作。教学组织：教师讲述和学生自学结合。成绩评价：课程论文（50%）；按指定题目在规定时间内完成。闭卷考试（50%）。参考书籍：分子遗传学。南京大学分子遗传学，张玉静