色谱法气相与液相.ppt

34．毛细管气相色谱分离复杂试样时，通常采用程序升温的方法来改善分离效果。35．毛细管色谱的色谱柱前需要采取分流装置是由于毛细管色谱柱对试样负载量很小；柱后采用“尾吹”装置是由于柱后流出物的流速太慢。??第29页，共57页，星期日，2025年，2月5日第30页，共57页，星期日，2025年，2月5日第五节高效液相色谱仪第31页，共57页，星期日，2025年，2月5日用高压输液泵将流动相泵入装有固定相的色谱柱进样阀注入测定样品，由流动相带入柱内在色谱柱内分离各组分组分分离后依次进入检测器，记录仪记录色谱峰定性：色谱峰的位置定量：峰高(或峰面积)一、高效液相色谱仪工作原理第32页，共57页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱仪结构框图废液分离柱检测器数据处理进样装置温度控制流量控制梯度装置高压泵记录仪脱气装置储液槽第33页，共57页，星期日，2025年，2月5日检测器色谱柱（固定相）样品组分1＋2＋3流动相流动相流动相流动相流动相流动相时间（t）响应R图5.1色谱分离原理示意图进样峰123112223333第34页，共57页，星期日，2025年，2月5日输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据记录处理系统。二、高效液相色谱仪的基本结构第35页，共57页，星期日，2025年，2月5日（一）输液系统提供流动相贮液器过滤器和脱气装置高压输液泵梯度洗脱装置流量控制注意：高压输液泵是HPLC最重要的部件,其性能对分离及检测均有十分明显的影响。第36页，共57页，星期日，2025年，2月5日（二）进样系统注射器：优点：简单、方便缺点：重现性差、耐压力差（高压下溶液漏液）自动进样：优点：简单、方便、重现性好阀进样：第37页，共57页，星期日，2025年，2月5日六通阀六通阀进样装置进样量可由样品管控制，进样准确，重复性好。第38页，共57页，星期日，2025年，2月5日（三）分离系统分离系统是高效液相色谱仪的重要部件，其核心是色谱柱。第39页，共57页，星期日，2025年，2月5日（四）检测系统1.紫外-可见光检测器固定波长检测器可变波长检测器（190nm-800nm）光电二极管阵列检测器1.低压汞灯；2.透镜；3与6.遮光板；4.参比池；5.测量池；7.紫外滤光片；8.双子外光敏电阻56782.荧光检测器3.电化学检测器第40页，共57页，星期日，2025年，2月5日（五）数据记录处理系统记录仪、积分仪或色谱工作站记录仪记录色谱流出曲线积分仪的作用主要用于求色谱峰的面积（定量）。第41页，共57页，星期日，2025年，2月5日（一）高效液相色谱仪的使用三、高效液相色谱仪的使用与维护第42页，共57页，星期日，2025年，2月5日关于色谱法气相与液相第1页，共57页，星期日，2025年，2月5日1.生化项目检测分离分析氨基酸、蛋白质、核糖核酸、维生素、肽、酶、抗原抗体2.临床检验体液或者尿液中的有机酸、糖、激素等3.药物检测药物成分成分测定、含量分析色谱方法临床应用第2页，共57页，星期日，2025年，2月5日检测器色谱柱（固定相）样品组分1＋2＋3流动相流动相流动相流动相流动相流动相时间（t）响应R图5.1色谱分离原理示意图进样峰123112223333第3页，共57页，星期日，2025年，2月5日第四节气相色谱仪第4页，共57页，星期日，2025年，2月5日试样各组分在气相和固定相间的分配系数不同被分离分离后的组分按保留时间的先后顺序进入检测器记录信号信号经放大后，在记录器上描绘出各组分的色谱峰定性分析：保留时间（出峰位置）定量分析：峰高或峰面积一、气相色谱仪的工作原理第5页，共57页，星期日，2025年，2月5日注射器气路系统二、气相色谱仪的基本结构载气源减压阀净化器稳压阀稳流阀进样气化色谱柱检测器放大器记录仪温度控制系统进样系统检测系统分离系统温控系统记录系统第6页，共57页，星期日，2025年，2月5日（一）气路系统：作用：向色谱柱提供质地洁净、流动平稳的流动相。组成：载气源、减压阀、净化器、稳压阀、稳