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电喷雾电离源（ESI）一种大气压电离源主要用于HPLC-MS，既是接口又是质谱的电离源。ESI+离子肼质谱示意图第23页，共42页，星期日，2025年，2月5日工作过程：在大气压条件下将样品溶液通过喷雾毛细管送入离子源内，在高压电场的作用下形成带电微滴。再用热干燥气吹扫使雾滴中的溶剂蒸发，雾滴体积逐步缩小，电荷密度骤增，发生库仑爆炸，最终成为去溶剂化的离子。在毛细管端盖反向电位及真空的吸引下进入毛细管到达质量分析器。毛细管CID碰撞区自HPLC柱出口喷雾气喷雾器试样离子流动相+试样离子端盖反相电压热干燥气电喷雾电离源（ESI）第24页，共42页，星期日，2025年，2月5日（1）ESI适用于易在流动相中形成离子或极性较高的化合物。（2）ESI通常可以得到多电荷分子离子，大分子可以带10－100以上电荷，其质荷比大大降低，可用普通质量测定范围的质谱仪进行生物大分子分析。（3）属于软电离方式，适合测定分子量大、稳定性差的化合物，如蛋白质、肽、糖等。电喷雾电离源（ESI）特点：第25页，共42页，星期日，2025年，2月5日大气压化学电离源（APCI）一种大气压电离源主要用于HPLC-MS，既作为接口又是质谱的电离源。工作过程：APCI喷嘴下方有一针状放电电极，其高压放电首先使空气中中性分子和溶剂电离，形成反应离子，反应离子再与试样分子发生离子-分子反应，使试样分子离子化，其余与ESI相同。大气压化学电离源第26页，共42页，星期日，2025年，2月5日ESI和APCI离子化方法都能够生成正离子或负离子。正离子和负离子方式下的质谱图完全不同，但可以相互补充。在正离子检测方式下，本身离子型化合物，得到的是M+；其他中性分子，容易得到准分子离子（质子加合离子），如[M+Na]+、[M+Na+CH3OH]+等。在APCI源离子化过程中，可得到较强的[M+H]+。负离子（如：[M-H]-）比正离子产生的少，但负离子扫描方式产生的噪音比正离子方式低，具有更好的专属性。ESI与APCI离子化方式第27页，共42页，星期日，2025年，2月5日3.2.2离子肼质量分析器组成：环电极+端电极（2）特点：结构小巧、质量轻、灵敏度高，具有多级质谱功能。GC-MS、HPLC-MS均可用。离子阱质量分析器结构示意图(c)自离子源至检测器端电极环电极U＋Vcosωt(a)(b)r0z0自离子源（肼入口）至检测器（肼出口）第28页，共42页，星期日，2025年，2月5日离子阱串接多级质谱是利用离子贮存装置运行适当的程序进行MSn实验。在同一个离子阱中，第一级质量分析用于选择一个前体离子(Precursorion)，然后，用CID方法使这一离子裂解生成产物离子(Productions)，对其进行第二级质量分析。以此类推可至MSn级质谱。离子肼-时间串联质谱第29页，共42页，星期日，2025年，2月5日花色苷：DAD-TIC-MS1-MS2第30页，共42页，星期日，2025年，2月5日第1页，共42页，星期日，2025年，2月5日1.1色谱基本知识利用混合物中各组分物理化学性质和结构上的差异，使其在两相中进行分离，检测各组分的组成和含量的方法。可对混合物进行分离、分析的仪器分析方法具分离效能高，选择性好、灵敏度高、分析速度快等优点，其与红外光谱、质谱等手段联用成为混合物解析的重要手段。第2页，共42页，星期日，2025年，2月5日色谱过程第3页，共42页，星期日，2025年，2月5日纸色谱法薄层色谱法高效液相色谱法液相色谱LC气相色谱GC柱层析毛细管柱色谱法填充柱色谱法色谱法分类第4页，共42页，星期日，2025年，2月5日色谱法适用范围GC：分子量低于1000，沸点低于350℃、热稳定HPLC：只需配制成溶液有机物HPLC80%GC20%第5页，共42页，星期日，2025年，2月5日色谱定性、定量保留时间定性峰高/峰面积定量第6页，共42页，星期日，2025年，2月5日1.2质谱基本知识质谱法：分子受到能量裂解后，形成带电荷的离子，这些离子按照其质量m和电荷z的比值m/z（质荷比）大小依次排列成谱被记录下来，得到质谱（MS）。第7页，共42页，星期日，2025年，2月5日质谱法是有机物鉴定（定性、定结构）四大工具中灵敏度最高，也是唯一可以直接确定分子式、相对分子质量的方法。历史：20世纪初，Thomson发现其原理；60年代后迅速发展。特点：