基因工程的基本操作程序第3课时课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

选择性必修三《生物技术与工程》第3章基因工程第2节基因工程的基本操作程序第三课时

目的基因的筛选与获取一目录基因表达载体的构建二目的基因的检测与鉴定四将目的基因导入受体细胞三

第四步：目的基因的检测与鉴定知识要知道将表达载体导入受体细胞后，如何判断导入是否成功？即使导入成功，如何判断目的基因是否可以正常表达？1.分子水平检测2.个体生物学水平鉴定目的检测目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性。

第四步：目的基因的检测与鉴定知识要知道1.检测的内容和方法2.鉴定的目的和方法1.分子水平检测③检测目的基因是否翻译成蛋白质②检测目的基因是否转录出了mRNA①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因新知识自学(P82-83页）抗原-抗体杂交PCR等技术检测

第四步：目的基因的检测与鉴定知识要知道1.分子水平检测③检测目的基因是否翻译成蛋白质②检测目的基因是否转录出了mRNA①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因抗原-抗体杂交PCR等技术检测苏云金杆菌提取Bt毒蛋白注射抗体标记抗体转基因棉花提取蛋白电泳分离抗原-抗体杂交

第四步：目的基因的检测与鉴定知识要知道1.检测的目的和方法2.鉴定的目的和方法2.个体生物学水平鉴定新知识自学(P82-83页）例：确定棉花是否赋予了抗虫特性以及抗性的程度抗虫植物饲喂害虫（抗虫接种实验）害虫死亡抗盐植物抗除草剂植物抗病毒（菌）植物获取目的基因产物的转基因生物用一定浓度盐水浇灌正常生长鉴定方法成功标志喷洒除草剂正常生长病毒（菌）接种实验未染病提取细胞产物与天然产品进行功能活性比较功能、活性正常

探究·实践DNA片段的扩增及电泳鉴定知识要知道PCR仪DNA片段的扩增电泳装置琼脂糖凝胶电泳

知识要知道探究·实践DNA片段的扩增及电泳鉴定1.实验原理：PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。一次PCR一般要经历30次循环。（1）DNA片段的扩增（2）DNA片段的电泳鉴定DNA在一定的pH下会带上电荷，带电的DNA会在电场的作用下向所带电荷相反的电极移动，即电泳。PCR产物一般用琼脂糖凝胶电泳鉴定，其在凝胶中的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小和构象（如链状和环状）等有关。凝胶中的DNA通过染色，可在300nm紫外灯下被检测出来。

知识要理解探究·实践DNA片段的扩增及电泳鉴定1.实验原理：（2）DNA片段的电泳鉴定DNA在一定的pH下会带上电荷，带电的DNA会在电场的作用下向所带电荷相反的电极移动，即电泳。PCR产物一般用琼脂糖凝胶电泳鉴定，其在凝胶中的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小和构象（如链状和环状）等有关。凝胶中的DNA通过染色，可在300nm紫外灯下被检测出来。DNA分子中的磷酸基团能解离出氢离子，剩下的部分（DNA的磷酸残基）带负电荷，因此DNA分子可从负极向正极迁移，

知识要理解探究·实践DNA片段的扩增及电泳鉴定1.实验原理：（2）DNA片段的电泳鉴定DNA在一定的pH下会带上电荷，带电的DNA会在电场的作用下向所带电荷相反的电极移动，即电泳。PCR产物一般用琼脂糖凝胶电泳鉴定，其在凝胶中的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小和构象（如链状和环状）等有关。凝胶中的DNA通过染色，可在300nm紫外灯下被检测出来。电源凝胶浓度越小，筛孔越大，DNA分子迁移速率就越高。凝胶浓度相同时，DNA分子越大，迁移速率越低。

知识要理解探究·实践DNA片段的扩增及电泳鉴定1.实验原理：（2）DNA片段的电泳鉴定DNA在一定的pH下会带上电荷，带电的DNA会在电场的作用下向所带电荷相反的电极移动，即电泳。PCR产物一般用琼脂糖凝胶电泳鉴定，其在凝胶中的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小和构象（如链状和环状）等有关。凝胶中的DNA通过染色，可在300nm紫外灯下被检测出来。

知识要理解探究·实践DNA片段的扩增及电泳鉴定（2）DNA片段的电泳鉴定DNA在一定的pH下会带上电荷，带电的DNA会在电场的作用下向所带电荷相反的电极移动，即电泳。PCR产物一般用琼脂糖凝胶电泳鉴定，其在凝胶中的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小和构象（如链状和环状）等有关。凝胶中的DNA通过染色，可在300nm紫外灯下被检测出来。例1、下列有关电泳的叙述，错误的是() A.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 B.待测样品中DN