转录及转录后加工.ppt

⑴修饰的化学反应：⑵5′-端的修饰在核内完成，且先于中段剪切。⑶5′帽子分Cap0、Cap1、Cap2。（一）5′-端加上帽子结构(mGpppNp—）5′pppN…磷酸酶ppi5′pN…pppGpi5′GpppN…甲基化酶+CH3m7GpppN…第62页，共94页，星期日，2025年，2月5日mRNA帽子的生理功能：⑶促进某些RNA的合成。⑴帽子结构参与翻译起始，帽0结构是核糖体识别mRNA所必需的；核糖体上有帽结合蛋白。⑵帽子结构增加mRNA的稳定性，保护mRNA防止其受5′核酸外切酶的降解。第63页，共94页，星期日，2025年，2月5日（二）3′-端加上多聚腺苷酸尾巴(polyA)。⑴polyA的出现不依赖DNA模板。⑵加尾信号：3′-末端出现AAUAAA及下游的GU丰富区。在两序列之间由特异的核酸内切酶切除多余的核苷酸，然后加上polyA。尾部修饰和转录终止同时进行。⑶3′-端修饰也在核内完成，并先于mRNA中段的剪接。⑷polyA的有无及长短是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身稳定性的因素。第64页，共94页，星期日，2025年，2月5日第65页，共94页，星期日，2025年，2月5日mRNA3′-端的多聚腺苷酸化可被冬虫夏草素（3′-脱氧胸苷）所阻止；即冬虫夏草素是多聚腺苷酸化的特异抑制剂。（三）mRNA的甲基化真核生物mRNA分子中有许多甲基化的碱基，主要是：N6-甲基腺嘌呤（m6A）。第66页，共94页，星期日，2025年，2月5日5、增强子（enhancer）：能结合反式作用因子，决定基因的时间和空间特异性表达，增强启动子转录活性的DNA序列。增强子作用特点：⑴增强效应十分明显：使转录频率增加百倍或千倍。⑵增强效应与其所处的位置和取向无关：增强子以5′→3′或3′→5′排列对启动子都有作用。⑶大多为重复序列：长约50bp，适合与反式因子结合，内部常有一个核心序列，为增强效应所必需。⑷增强效应具有严密的组织和细胞特异性。⑸没有基因专一性。⑹许多增强子受外部信号的调控。第30页，共94页，星期日，2025年，2月5日GCGC-CAAT-TATA-ATGAATAAA切离加尾真正终止点修饰点外显子内含子翻译起始转录起始TATA盒CAAT盒GC盒增强子真核生物RNApolⅡ的启动子第31页，共94页，星期日，2025年，2月5日（三）RNA聚合酶Ⅲ的启动子即tRNA基因的启动子，称Ⅲ类启动子。Ⅲ类启动子位于转录起始点下游，称下游启动子或内部启动子。Ⅲ类启动子包括：A盒、B盒A盒靠近5′方向；B盒靠近3′方向。Ⅲ类启动子需要的转录因子包括：TFⅢC、TFⅢB、TFⅢA，前两者是共同的，后者为5SrRNA基因转录所需。第32页，共94页，星期日，2025年，2月5日第33页，共94页，星期日，2025年，2月5日三、原核生物和真核生物转录起始位点的结构差异原核生物真核生物帽子结构没有有起始核苷酸嘌呤或嘧啶嘌呤（A为主）启动区范围较小(＋1～－70)较大(＋1～－110)上游序列TTGACACAAT、GC、增强子第34页，共94页，星期日，2025年，2月5日图5-4P155页原核生物与真核生物启动子比较第35页，共94页，星期日，2025年，2月5日原核生物和真核生物转录及抑制剂第四节原核生物转录的起始原核生物转录的延长原核生物转录的终止与新合成RNA链的释放真核生物的转录RNA生物合成抑制剂第36页，共94页，星期日，2025年，2月5日转录起始需解决两个问题：RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。一、原核生物转录的起始