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自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时,仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。;1973年,科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌,进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。;2.为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢?;1.在被石油污染的土壤中可以筛选微生物;
2.在冰川冻土层可以筛选微生物;
3.漆酶属于木质降解酶类,分离产漆酶菌株的首选样品是
生活污水吗?;1.实验室中微生物筛选的原理;一、选择培养基;一、选择培养基;项目;尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以作为细菌生长的氮源。;1g土壤中有多少能分解尿素的细菌?;1.选择培养基的制备;2.对土壤样品进行稀释;2.对土壤样品进行稀释;3.涂布平板操作;4.培养并观察培养基菌落;习题巩固;注意事项;主要方法;①稀释涂布平板法;要求:
①选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证
获得菌落数为30-300、适于计数的平板。
②同一稀释度至少对3个平板进行重复计数,然后求平均值;
;;血细胞计数板:
细菌计数板:;每毫升原液所含细菌数
=400小格的数量×104×稀释倍数;稀释涂布平板法
显微镜直接计数法
;提出问题;实验过程;(3)样品的稀释与涂布平板;(4)微生物的培养与观察;1.结合对照组,分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。
2.你是否获得了某一稀释度下菌落数为30-300的平板?在这一稀释度下,是否至少有2个平板的菌落数接近?
3.你统计的每克土样中能分解尿素的细菌的菌落数是多少?与其他同学统计的结果接近吗?如果差异很大,可能是什么原因引起的?
;本活动只是初步筛选了能分解尿素的细菌,对分离的菌种进行鉴定还需要借助生物化学的方法。你可以查阅相关资料,进一步设计实验来鉴定自己分离的菌种。;一、概念检测;二、拓展应用;2.地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨,其中40%-60%能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们能够产生纤维素酶。对这些微生物的研究与应用,使人们能够利用精杆等生产酒精,用纤维索酶处理服装面料等。已知刚果红是一种染料,它可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红与纤维素形成红色复合
物;而当纤维索被纤维素分解菌分解后,复合物就无法形成,培养基中会出现以这些菌
为中心的透明圈(如下图所示)。请回答下列问题。
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