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输血科交叉配血试验标准操作规程.pdfVIP

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输血科交叉配血试验标准操作规程

1、目的:规范实验室工作人员的操作程序,确保实验过程及结

果的准确与可靠。

2、范围:本规程适用于本实验室红细胞意外抗体筛查与鉴定试

验操作。

3、职责

3.1工作人员对进行红细胞意外抗体筛查和鉴定试验技术操作应

熟练掌握。

4、交叉配血输(血相容/配合)试验

4.1基本原理

交叉配血主要是检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗

体,使受血者与供血者的血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成

分。交叉配血的要求是选择的技术尽可能多地检测出具有临床意义的

抗体包(括不配合的IgM和IgG抗体),在任何步骤均不出现溶血或

同种凝集的结果,最大限度地减少抗体的漏检,防止溶血输血反应

的发生,方可将供者的血液成分输给受血者。完整的交叉配血试验应

包括:

1)复查收到的受血者血样的ABO、Rh血型以及抗体筛查的结果。

2)查阅受血者以前的血型检查记录,如与此次结果不符,应及

时分析原因。

3)选择预先进行血型检查的合格献血者作交叉配血试验。

4.2基本内容

交叉配血试验包括下述几项

1)主侧配血:受血者血清与供者红细胞反应,检测受血者体内

是否存在针对供者纤细胞的抗体。

2)次侧配血:受血者红细胞与供者血清反应,检测供者血液中

是否存在针对受血者红细胞的抗体。

3)自身对照:受血者红细胞与自身血清反应,以排除自身抗体、

直接抗球蛋白试验阳及红细胞缗钱状假凝集等干扰试验结果判读

因素。

交叉配血反应体系均应在37℃孵育。使用能检出不完全抗体的

配血方法进行交叉配血。除了使用盐水介质法外,还应使用能检出其

他血型系统抗体的方法,例如:抗球蛋白试验,酶技术、聚凝胺法、

微柱凝胶卡式检测法,白蛋白介质、低离子强度介质或其他合适的促

凝等方法。

4.3盐水介质法

4.3.1方法原理

盐水介质交叉配血试验(又称〃立即离心〃配而试验),是根据IgM

抗体在盐水介质中可与红细胞上对应抗原结合产生肉眼可见凝集的

特点,将献血者红细胞与受血者血清(或血浆)、献血者血清(或血

浆)与受血者红细胞在盐水介质中进行抗原抗体反应,以检测受血者

(或献血者)血液中是否存在针对献血者(或受血者)红细胞抗原的

IgM抗体,即可以发现临床上最重要的AB。不配合。此方法可以检

测出IgM,不能检测出IgG完(全抗体IgG极其罕见,临床日常操作

不用考虑)。

4.3.2仪器、试剂与耗材

1)仪器:台式低速离心机、血型血清学专用离心机、阅片灯箱、

显微镜、试管架;

2)试剂:0.9%生理盐水;

3)耗材;硬试管、一性塑料滴管、载玻片、记号笔等。

4.3.3标本要求

1)推荐使用EDTA抗凝静脉血+不抗凝静脉血各一管,静脉血管

条件不好或紧急情况下也可以使用动脉血,标本采集量23mL;

2)标本标识清晰、准确、完整,能反映受血者当前的免疫学状

态;

3)标本质量符合要求,无血液稀释、细菌污染,离心后无溶血

及明显乳糜;

4)标本原则卜在检测前不保存,收到标本后应及时进行相关检

测。

4.3.4操作步骤

1)用0.9%生理盐水将受血者和供血者的抗凝血配成2%-5%的红

细胞悬液推(荐生理盐水三洗红细胞,市面上有专门用于三洗红细胞

的细胞洗涤离心机,可省去人工操作);

2)按标记〃主测〃管加受血者血清2滴和供血者红细胞悬液1滴;

“侧〃管加供血者血清2滴和受血者红细胞悬液1滴。

3)混匀,使用血型血清学专用离心机1000g,离心15s;

4)轻轻摇动试管,观察有无凝集或溶血,必要时显

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