DB37T 2958-2017 氟喹诺酮类药物可溶性粉中非法添加物利巴韦林的测定 高效液相色谱-串联质谱法　　.docxVIP

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DB37

山东省地方标准

DB37/T2958—2017

氟喹诺酮类药物可溶性粉中非法

添加物利巴韦林的测定

高效液相色谱-串联质谱法

DeterminationofRibavirinadulterationinFluoroquinolonespowderbyHPLC-MS/MS

2017-05-23发布2017-06-23实施山东省质量技术监督局发布

I

DB37/T2958—2017

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局管理并提出。

本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省兽药质量检验所。

本标准主要起草人：高迎春、魏秀丽、陈玲、张传津、张呈军、杨林、薄永恒、陆庆泉、陈志强、崔山。

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DB37/T2958—2017

氟喹诺酮类药物可溶性粉中非法添加物利巴韦林的测定高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本标准规定了氟喹诺酮类药物可溶性粉中非法添加物利巴韦林的高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定方法。

本标准适用于氟喹诺酮类药物可溶性粉(10%乳酸环丙沙星可溶性粉、10%恩诺沙星粉、5%盐酸沙拉沙星可溶性粉)中非法添加物利巴韦林的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3原理

氟喹诺酮类药物可溶性粉中非法添加的利巴韦林以甲醇-乙腈(1+1)提取稀释后，取上清液经高效液相色谱分离，用串联质谱检测，外标法定量。

4试剂或材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂，水符合GB/T6682一级水的规定。

4.1甲醇(CH?OH):色谱纯。

4.2甲酸(HCOOH):色谱纯。

4.3乙腈(CH?CN):色谱纯。

4.4乙酸铵(CH?COONH?)。

4.5甲醇-乙腈(1+1):准确量取甲醇(4.1)100mL,加入乙腈(4.3)100mL,混匀，备用。

4.6流动相

流动相A:准确量取甲酸(4.2)1.0mL,加乙腈(4.3)稀释至1000mL,过0.22μm有机系微孔滤膜，现用现配。

流动相B:称取乙酸铵(4.4)0.7708g,加水100mL,加入甲酸(4.2)1.0mL,用水稀释至1000mL,过0.22μm水系微孔滤膜，现用现配。

4.7利巴韦林对照品：纯度≥96.0%。

4.8利巴韦林对照品储备液：精密称取利巴韦林对照品10mg,加乙腈溶解并定容至100mL,制成100μg/mL的溶液，作为对照品储备液，-18℃冰箱保存，有效期3个月。

4.9利巴韦林对照品中间工作液：准确量取0.2mL上述储备液(4.8),加初始比例流动相并定容至

100mL,为200ng/mL的对照中间工作液，4℃冰箱保存，有效期1周。

2

DB37/T2958—2017

5仪器设备

5.1高效液相色谱串联质谱仪，配电喷雾离子源(ESI)。

5.2天平：感量0.001g,感量0.00001g。

5.3振荡器。

5.4离心机(5000r/min)。

6试验步骤

6.1阴性空白样品

经检测不含利巴韦林的氟喹诺酮类药物可溶性粉。

6.2提取

称取阴性空白样品、供试试样各0.2g(准确到0.0001g)分别置于50mL离心管中，准确加入甲醇-乙腈(4.5)20mL,振荡10min,5000r/min离心10min,准确量取0.5mL上清液，用初始流动相定容至100mL容量瓶，摇匀，从中准确量取0.5mL,用初始流动相定容至20mL容量瓶，摇匀，用滤膜(0.22μm)滤过，滤液待测。

6.3仪器参考条件

6.3.1高效液相色谱参考条件

色谱柱：氨基色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),填料基于亚乙基桥杂化颗粒的三键键合酰胺基。

或性能相当者；

流速：0.25mL/min;柱温：35℃;

进样量：2μL。

液相色谱梯度洗脱程序见表1。

表1液相色谱梯度洗脱程序

时间/min

A/%

B/%

0

80

20

1

80

20

2

10

90

2.5

20

80

2.