微生物的培养技术及应用34课时.pptx

第2节微生物的培养技术及应用第二课时微生物的选择培养和计数

学习目标010203通过对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数，理解并掌握微生物计数的方法。（科学探究）通过实例，理解各类微生物都能适应其生活环境。（生命观念）根据微生物的代谢类型，配制选择培养基，总结分离微生物的过程和测定微生物数量的常用方法。（科学思维）

温故知新：酵母菌的纯培养酵母菌的纯培养2.接种和分离酵母菌1.制备培养基3.培养酵母菌①配制培养基（马铃薯、葡萄糖、琼脂、水）②灭菌③倒平板（在酒精灯火焰附近操作）培养基：湿热灭菌（高压蒸汽灭菌锅）培养皿：干热灭菌（干热灭菌锅）用接种环在固体培养基上用平板划线法接种平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱培养问题1：自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢？选择培养基应运而生。

PCR是一种在体外DNA复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。（一）科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶黄石公园（视频）1.筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。耐高温的酶耐高温生物体高温环境（热泉、火山口）寻找寻找2.筛选思路：一、选择培养基文山市第一中学选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定

寻找耐高温的DNA聚合酶（一）科学实例：3.启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。耐寒微生物耐热微生物石油分解菌问题2：这对在实验室中选择培养特定的微生物有什么启示？如何筛选？什么是选择培养基？文山市第一中学选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定

文山市第一中学选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定问题2：这对在实验室中选择培养特定的微生物有什么启示？如何筛选？什么是选择培养基？阅读教材P16第2段，并思考以下问题：问题3：怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？问题4：如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？

（二）实验室中微生物筛选的原理：人为提供的条件（包括、和等），同时。有利于目的菌生长抑制或阻止其他微生物的生长营养温度pH（三）概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。（四）类型：在培养基中加入某种化学物质改变培养基中的营养成分改变微生物的培养条件文山市第一中学选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定

+氨苄青霉素具有抗氨苄青霉素能力的菌落没有氨苄青霉素抗性的细菌在培养基中加入某种化学物质培养基+氨苄青霉素培养基没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?问题3：怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？文山市第一中学选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定

应该设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。基础培养基选择培养基问题3：怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？问题4：如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？文山市第一中学选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定

文山市第一中学选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定不同类型选择培养基的应用不加碳源自养微生物不加氮源固氮微生物加入青霉素酵母菌和霉菌(青霉素能杀死细菌、放线菌)加高浓度食盐金黄色葡萄球菌石油是唯一碳源能消除石油污染的微生物

任务一：请同学们自主学习教材P16页，小组合作思考讨论完成问题。1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？文山市第一中学选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定

选择培养基配方的设计思考.讨论尿素含氮量高，化学性质稳定，是一种重要的农业氮肥，尿素施入土壤后，被某些细菌分解成NH3，NH3再转化成NO3-、NH4+等才能被植物吸收。土壤中尿素分解菌之所以能将尿素分解，是因为它们能合成脲酶：尿素的立体结构问题4：如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？CO(NH2)2+H2O2NH3+CO2脲酶文山市第一中学选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定

选择培养基配方的设计思考.讨论问题1：如果让