微生物的培养技术及应用2004年.doc

第1章第2节微生物的培养技术及应用

一、培养基的配制

1．培养基

人们按照微生物对_______的不同需求，配制出供其_________的营养基质。

2．培养基的种类

①按物理状态可分为液体培养基和。

②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。

3．培养基的营养组成

各种培养基一般都含有、、和无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的需求。

二、无菌技术

1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止__________。

2．消毒和灭菌

消毒

灭菌

概念

使用较为的物理、化学或生物等方法杀死物体或内部一部分微生物

使用的理化方法杀死物体内外的微生物，包括____

常用方法

___消毒法、巴氏消毒法、___消毒法、紫外线消毒法

____灭菌、干热灭菌、____灭菌

适用对象

操作空间、双手等

接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

3.具体操作

(1)对实验操作的、操作者的衣着和手进行清洁和。

(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行。

(3)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与接触。

(4)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在并在附近进行。

三、微生物的纯培养

1．纯培养：在微生物学中，将接种于内，在合适条件下形成的含群体称为培养物。由所获得的微生物群体称为纯培养物，获得的过程就是纯培养。

2．微生物纯培养的步骤：微生物的纯培养包括配制培养基、、、分离和培养等步骤。

3．酵母菌的纯培养

(1)菌落：分散的微生物在适宜的表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的。

(2)获得单菌落的方法：法和法。

(3)纯培养过程：

①制备培养基：→灭菌→。

②接种和分离酵母菌

Ⅰ.方法：通过接种环在固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

Ⅱ.操作步骤

a.将放在灼烧，直到接种环的金属丝烧红。

b.在冷却接种环。同时拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞。

c.将试管口通过火焰。

d.在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。

e.将试管口通过火焰，并塞上棉塞。

f.在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划平行线，盖上皿盖。

g.灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的开始第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将相连。

③培养酵母菌

完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和倒置，放入左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养h。

易错易混辨析

(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质()

(2)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上()

(3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害()

(4)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落()

(5)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落()

(6)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌()

(7)平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧()

2.1微生物的培养技术及应用参考答案

一、1.营养物质生长繁殖2．①固体培养基3.水碳源氮源pHO2

二、1.杂菌污染2.消毒：温和表面煮沸化学药物灭菌：强烈的所有芽孢和孢子湿热灼烧3.（1）空间消毒（2）灭菌（3）周围的物品（4）超净工作台酒精灯火焰

三、1.培养基特定种类微生物单一个体繁殖纯培养物