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毛细管离心技术在输血科的应用2025
Rh血型系统是人类除ABO血型系统外最重要的系统。对于某些需要长期输血治疗的患者来说,多次输入与其Rh抗原不匹配的红细胞后,就有可能产生针对某些抗原的特异性抗体,引起溶血性输血反应。故对于此类患者,Rh系统抗原配合性输血能够有效提高患者输血安全性。然而对于部分有输血史的患者,其Rh表型结果呈混合外观,无法确定其正确的表型结果。此时我们可采用毛细管离心分离技术,有效分离新生红细胞与陈旧细胞,准确鉴定血型
毛细管离心技术原理
根据红细胞的密度差和沉降速度差进行分离,由于新鲜细胞和陈旧细胞的核质比有一定的差异,最终导致细胞的密度有所不同,通过超速离心使不同密度的细胞进行层次分离,从而达到分离新、旧细胞的目的。由于新生红细胞比成熟红细胞的比重小,运用离心技术可以分离有近期输血史的受血者血管内的不同群红细胞。
毛细管离心技术操作步骤
1)将白膜层红细胞用生理盐水洗涤三次,最后一次1000×g离心5min,
在不破坏白膜层的情况下,尽可能的去掉上清。(2)将洗涤后的白膜层红细胞吸出后混合,加入1-2根比积管中,留出5mm长度封口用。(3)从血液加入端用橡皮泥将管底封死,挤出的血液用纱布吸走。(4)放入有编
号(记录编号与患者对应)的离心槽中,注意平衡,拧紧内盖,关上离心机外盖10000r/min,离心15-25min。(5)在距红细胞柱顶(近心端)3mm处,切开比积管(或在另一端用橡皮泥挤出约3mm血液),将此段红细胞洗入盐水管中三洗。(6)三洗后的红细胞配制成0.8%(微柱法)或2-5%(试管法),进行血型抗原鉴定或DAT检测。
毛细管离心技术临床应用
1、分离输血后3天以上的标本比分离刚输过血的标本效果要好。在24小时分离的年轻红细胞中仍存在供血者的红细胞。在48小时,除非短时内输了大量血液,一般供血者的血型抗原可在分离的年轻红细胞群中消失。输血后短时内分离出自身红细胞是可能的。2、只对产生正常数量或者大量的网织红患者有效,对不能产生正常网织红细胞输出血患者无效,典型再生障碍性贫血的输血患者无效。网织红细胞减少表示骨髓造血功能减低,常见于再障、骨髓病性贫血。3、在衰老的网织红细胞某些抗原表达减弱,
一些抗原不能很强的表现出来,尤其在检测E、e、c、Fy、Jk和Ge抗原时特别注意;网织红细胞上D抗原位点数约为成熟红细胞的60%。4、红细胞寿命约为120天。一般而言,进入血循环中的红细胞成为熟红细胞,但也有一定比例的网织红细胞。网织红细胞数量越多,其群体细胞的平均年龄越轻,反之则老。
讨论
临床工作中我们经常会遇到一些近期有输血史的患者,其血型鉴定结果呈
混合外观,给我们的输血工作带来一定困扰。故实际工作中遇到此类标本,应及时了解患者的输血史、网织红细胞计数等,善用毛细管离心分离技术。因新生细胞与陈旧细胞相比密度有所不同,在毛细管超速离心后,新生细胞密度较小,离心后位于管顶部,从而使新旧细胞可以得到较好的分离。
需要注意的是,此技术对于输血3天及以上的标本比分离刚输过血的标本效果要好,且只对产生正常数量或者大量网织红细胞的受检者有效,而对不能产生正常网织红细胞的或者典型的再障患者无效。
此技术应用于输血科实验室,有益于有输血史的患者血型的准确定型及溶血性输血反应的回顾性调查。且此方法操作简单、快速,较易掌握,对于临床输血工作具有重要的临床意义。
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