2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体 (1)教学课件教学课件.pptxVIP

温故知新：动物细胞培养动物细胞培养动物细胞培养的概念和原理动物细胞培养的条件动物细胞培养的过程原理：细胞的增殖在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术(1)营养条件(2)无菌、无毒的环境(3)温度、pH和渗透压(4)气体环境取动物组织单个细胞细胞悬液原代培养传代培养

目录CONTENTS动物细胞融合技术1/单克隆抗体及其应用2/第2节动物细胞工程

目标010203结合具体实例，以流程图的形式表示单克隆抗体的制备过程。（科学探究）运用结构与功能观，理解动物细胞融合技术的原理和过程。（生命观念）说明单克隆抗体的特点及应用。（社会责任）学习目标

植物体细胞杂交植物细胞融合植物组织培养温故知新：植物体细胞杂交技术问题1:植物体细胞杂交技术可以跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，培育出新的作物类型。那么，有没有技术让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢？

人细胞鼠细胞红色荧光染料标记的膜蛋白绿色荧光染料标记的膜蛋白细胞融合人鼠杂交细胞37°培养40min细胞融合实例：1970年人鼠细胞荧光标记融和实验现在学习：什么是细胞融合？人细胞和小鼠细胞如何融合在一起的呢？以前学习：这一实验以及相关的其他实验证据表明，细胞膜具有流动性。

动物细胞融合概念原理诱导方法使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。细胞膜具有一定的流动性一、动物细胞融合技术物理法：电融合法化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活病毒诱导法问题2:灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么呢？

一、动物细胞融合技术问题2:灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么呢？灭活：是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。细胞融合完成的标志：

P49思考：19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。

动物细胞融合结果意义运用形成具有原来两个或多个细胞的遗传信息的杂交细胞突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。一、动物细胞融合技术第一第二第三为制造单克隆抗体开辟了新途径。研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。至今，种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。

实战训练(1)与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒()(2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构()(3)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞()×√1.判断下列正误×

二、单克隆抗体及其应用血清（抗体主要分布部位）传统抗体制备方法:向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生多种浆细胞分泌抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。缺陷：产量低、纯度低，特异性差血清含量有限产量低(一)传统抗体制作方法及缺陷：抗体不纯

（１）动物体内产生的特异性抗体种类多达百万种；（２）每个B淋巴细胞（浆细胞）只分泌一种特异性的抗体。科学家发现：单克隆抗体体外培养时，一个B淋巴细胞不能无限增殖需解决问题：遗憾：如何解决这一难题？一个B淋巴细胞B淋巴细胞群克隆二、单克隆抗体及其应用如何获得大量、单一的抗体？单一抗体

动物细胞融合融合细胞动物细胞培养单克隆抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体二、单克隆抗体及其应用1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的试验方案：既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体1975年，米尔斯坦和柯勒1984年，诺贝尔生理学或医学奖

产生特定抗体的杂交瘤细胞的获得需要几次筛选？各自筛选的方法和目的是什么？会有几种细胞融合方式？杂交瘤细胞具有什么特点？单克隆抗体制备过程中为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？2341合作探究一：请同学们自主阅读教材P48-49，小组合作思考讨论完成问题。二、单克隆抗体及其应用

单克隆抗体的制备过程：

注射特定抗原从患骨髓瘤的小鼠体内取骨髓瘤细胞的培养多种已免疫B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合小鼠的脾脏中获取二、单克隆抗体及其应用多种杂交细胞2.单克隆抗体的制备过程

02杂交瘤细胞（多种）置于选择性培养基上培养第一次筛选融合的细胞B细胞自身融合未融合的B淋巴细胞B瘤骨髓瘤细胞自身融合未融合的骨髓瘤细胞2.单克隆抗体的制备过程B瘤B瘤第一次筛选：用特定的选择培养基，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才