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考向28基因工程及生物技术安全性与伦理问题
1.2(021湖北7)限制性内酶EcoRI识别并割;一:;;;1I一;双链DNA,用EcoRI
完全酶果蝇基因组DNA,理论上得到DNA片段的平均长度碱(基对)约为()
A.6B.250C.4000D.24COO
【答案】C
【解析】
【分析】限制性核酸内酶能识别特定的DNA序列,割特定的位点,在特定的碱基之间
割磷酸二酯键。
【详解】据图可知,EcoRI的酶位点有6个碱基对,曰于DNA分子的碱基组成为A、T、
G、C,则某一位点出现该序列的概率为l/4xl/4xl/4xl/l/4xl/4=l/4096,即4096=1000个
碱基对可能出现一个限制酶EcoRI的酶位点,故理论上得到DNA片段的平均长度碱(基
对)约为4000。C符合题意。
故选C。
2.(2021湖北16)某实验利用PCR技术获取目的基因,实验结果显示除目的基因条带(引
物与模板完全配对)外,还有2条非特异条带(引物和模板不完全配对)。为了减少反应非
特异条带的产生,以下措施中有效的是()
A.增加模板DNA量B.延长热变性的时间
C.延长延伸的时间D.提高复性的温度
【答案】D
【解析】
【分析】多聚酶链式反应P(CR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,PCR过程一般经
历下述三循环:95℃下使模板DNA变性、解链-55C下复性(引物与DNA模板链结合)
-72c下引物链延伸(形成新的脱氧核甘酸链)。
【详解】A、增加模板DNA的量可•以提高反应速度,但不能有效减少非特异性条带,A错
误:
BC、延长热变性的时间和延长延伸的时间会影响变性延伸过程,但对于延伸中的配对影响
不大,故不能有效减少反应非特异性条带,BC错误;
D、非特异性产物增加的原因可能是复性温度过低会造成引物与模板的结合位点增加,故可
通过提高复性的温度来减少反应非特异性条带的产生,D正确。
故选D。
3.2(021•全国乙卷高考真题)用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性,创造出更符
合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具能,其中4种限制性核酸内酶的
割位点如图所示。
IIII
GAATTCCCCGGGCTGCAGGATATC
CTTAAGGQGCCCGACGTCCTATAG
_tttt
限制酶:EcoRISmalPstIEcoRV
回答卜列问题:
(1)常用的DNA连接的有E.coliDNA连接酶和TDNA连接酶。上图中弊
4
割后的DNA片段可以用E.co〃DNA连接的连接。上图中前割后的DNA片
段可以用T4DNA连接睡连接。
2()DNA连接随催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学健是____________。
()DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征,如质粒DNA分子上有复制原点,可
以保证质粒在受体细胞中能;质粒DNA分子上有
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