液质联用法测定婴幼儿奶粉中左旋肉碱含量不确定度评定 .pdf

衲关用涮猝翎阪中成肉碱含量不确畋平定

左旋肉碱又称L一肉碱，是一种促进人体脂转换为动能的类碳水化合物，不仅可用于减肥类的保健食品，也可

用于婴幼儿食品。奶粉中的左旋肉碱是促进奶粉中的脂分解、代谢、供能的重要营养素，可以促进体内脂的代谢和

利用。婴幼儿饮食结构比较单一，其主要饮食来源为各种乳制品，主要能量来源为乳制品中的脂。添加左旋肉碱，可

以提高婴幼儿对奶粉中脂的利用率⑴。因此，本文依据SN/T5146—2019第二法［2］液相色谱-质谱法测定婴幼儿奶粉

中左旋肉碱的含量。同时，分析婴幼儿奶粉中的左旋肉碱含量不确定度，以供参考［3］。

1材料与方法

1.1试剂

乙月青（色谱纯，Merck）；甲醇（色谱纯，Merck）；氨水（AR,湖南汇虹）；盐酸（GR,国药集团）；甲酸（HPLC,

科密欧）,左旋肉碱（坛墨，批号2362012；含量9990%；U=05%）；D3-左旋肉碱（TRC,批号：5-BKS-60-2）。

1.2标准溶液配制

121标准储备液

称取左旋肉碱标准品730mg,乙腊溶解，配制成浓度为72927pg・mL-1的标准储备溶液，4°C以下避光保存。

122标准中间液

准确吸取标准储备液（72927pgmL-1）010mL,用乙睛稀释至10mL,摇匀，制成72927pgmL-1的标准中

间液，4°C以下避光保存。

123D3-左旋肉碱内标标准储备液

准确称取标准品500mg,用乙腊溶解，配制成浓度为500pg・mL-1的标准储备液，4°C以下避光保存。

124D3-左旋肉碱内标标准中间液

准确吸取D3-左旋肉碱内标标准储备液（500pgmL-1）020mL,用乙睛稀释至10mL,摇匀，制成10pgmL-1

的标准中间液，4°C以下避光保存。

125标准工作液

准确移取标准中间液和内标标准中间液适量，用01%甲酸水溶液溶解并稀释，配制成内标浓度为100ng-mL-1,

以及左旋肉碱浓度分别为03646、18232、182312、72927、145854、364635ng-mL-1的系列标准溶液，现用

现配。

1.3仪器与设备

AB-3500液质联用仪（美国AB）；十万分之一电子天平（XS205,梅特勒）；万分之一电子天平（AR224CN,

奥豪斯）；ASE-12固相萃取装置；TG18G-H离心机；WD-12氮吹仪；SHA-C（A）恒温水浴振荡器；SPE固相萃取

柱（OasisMCX柱，60mg/3mL,Waters）。

L4测定方法

141样品提取与净化

称取试样1g一50mL离心管一加内标标准中间液100pL一加入20mL的01mol-L-1盐酸溶液一摇匀，超声5

min一加入5mL的1mol-L-1氢氧化钾溶液，混匀一60°C水浴皂化30min一冷却至室温一加5mL的1mol-L-1盐酸

溶液一涡旋1min一移至50mL容量瓶一用01mol-L-1盐酸溶液润洗离心管，合并润洗液至容量瓶一用01mol-L-1

盐酸溶液定容至刻度一取100mL提取液于15mL离心管一加入90mL乙月青一涡旋混匀1min一离心一取100mL

上清液过OasisMCX固相萃取小柱(依次使用3mL甲醇、3mL水和3mL10mmol-L-1盐酸活化)一用3mL的10

mmol-L-1盐酸溶液淋洗一弃去淋洗液一抽干小柱一加2mL4%氨水甲醇溶液洗脱一收集洗脱液一40°C氮吹干一加入

10mL01%甲酸水溶液溶解残渣一过022pm滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。

142标准曲线建立

以左旋肉碱和D3-左旋肉碱浓度比为横坐标，左旋肉碱和D3-左旋肉碱内标峰面积比值为纵坐标，绘制标准曲线。

1.5建立数学模型

式中，X为样品中左旋肉碱的含量，mg-kg-1；V为样品定容体积，mL；n为样品稀释倍数；m为试样质量，g；

1000为换算系数。

1.6不确定度来源的识别

对过程分析可知，左旋肉碱含量测定的不确定度主要有以下4个方面［4］：样品称量过程引入的标准不确定度