Karpas-299 Cells人间变性大细胞淋巴瘤细胞系带STR图谱.docx

Karpas-299Cells人间变性大细胞淋巴瘤细胞系

细胞别名:KARPAS-299;Karpas299;KARPAS299;Karpas299;KARPAS299;K299

背景信息：详见相关文献介绍

【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性：一般进实验室都有师兄师姐带着做，他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则，如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作，在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞，细胞有时真的很脆弱，最好每天都去看看它，以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象，也好及时解决这些意外，避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种：细胞要分批传代，这样即使有一批出了问题，还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。但这是我血的教训，有一次细胞污染了，全军覆没。当时可后悔没有保种。细胞跟人一样，不同的细胞，培养特性是不一样的。培养过程中要细细体会，不同细胞系使用不同的培养基和血清。

传代比例：1:2-1:4(首次传代建议1:2)

HPAF-II/CD18Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MSC细胞、GM-346细胞、SUP-B15细胞

GM10173Cells(提供STR鉴定图谱)

HAP1C3orf33(-)4Cells(提供STR鉴定图谱)

Colo-201Cells;背景说明：该细胞源自一位７０岁白人男性，CSAp(CSAp-)和CEA阴性。;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮+贴壁;形态特性：淋巴细胞;相关产品有：NK-92MI细胞、BEL7404细胞、HaFe细胞

Karpas-299Cells人间变性大细胞淋巴瘤细胞系带STR图谱

生长特性：悬浮生长

形态特性：淋巴母细胞样

换液周期：每周2-3次

公司细胞系主要引进ATCC、DSMZ、JCRB、KCLB、RIKEN、ECACC等细胞库，细胞系体外培养，它们会成长为单层细胞，附着或紧贴在培养瓶上，或悬浮在体外的溶液中，细胞系复苏周期短，公司细胞系状态良好，饱满，有光泽等优点。EDTA的作用：许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白，胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于整联蛋白的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不下来的话)，而应该想其它办法。

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产品包装：复苏发货：T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)

PC-9/S1Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：SU86-86细胞、H-498细胞、D407细胞

DaoyCells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４-１：６传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：多边形;相关产品有：KMB-17细胞、UMRC-2细胞、Rat-2细胞

G-361Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：４传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：U-118MG细胞、U-87MG细胞、HCMEC细胞

Karpas-299Cells人间变性大细胞淋巴瘤细胞系带STR图谱

来源说明：细胞主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RIKEN等细胞库

物种来源：人源、鼠源等其它物种来源

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS１５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，Karpas-299Cells人间变性大细胞淋巴瘤细胞系质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存的量加的是不是太多，AC推荐是不超过