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摘要
微塑料是当今聚焦的一种新兴环境污染物,其种类多样,分布广泛。微塑料能够
进入植物体或覆盖在叶片表面,进而通过食物链进入植食性昆虫体内。关于微塑料对
昆虫影响的研究集中于家蚕和蜜蜂,较少涉及农业害虫。斜纹夜蛾(Spodopteralitura)
分布广泛且食性多样,其在自然环境中很容易通过食物链摄入微塑料。并且,当前防
治主要依赖化学杀虫剂,而关于微塑料暴露对斜纹夜蛾耐受杀虫剂影响还不清楚。本
论文以最常见的聚苯乙烯微塑料为模式,研究微塑料暴露对斜纹夜蛾耐受茚虫威、毒
死蜱和λ-高效氯氟氰菊酯的影响,同时根据解毒酶活性和基因表达量的变化探究作用
机制,主要研究结果如下:
1.三种杀虫剂致死中浓度测定及微塑料暴露对斜纹夜蛾耐药性的影响
采用人工饲料混毒法测定三种杀虫剂对斜纹夜蛾四龄幼虫的48h致死中浓度
(LC50),结果显示茚虫威、毒死蜱、λ-高效氯氟氰菊酯的LC50分别为4.23mg/kg、
8.49mg/kg、1.70mg/kg。微塑料预饲喂72h后斜纹夜蛾对茚虫威和毒死蜱的敏感性
显著提高,对高效氯氟氰菊酯的敏感性则无影响;微塑料与杀虫剂联合暴露仅在高浓
度处理下提升斜纹夜蛾对杀虫剂的敏感性;并且,斜纹夜蛾对杀虫剂的敏感性与微塑
料粒径大小无关。
选择NP(0.1μm)、MP(10μm)两种粒径的微塑料按照浓度1mg/kg采用预饲
喂72h的方式测定LC50。与对照组相比,NP处理对茚虫威和毒死蜱增效比为1.56
和1.35,而对λ-高效氯氟氰菊酯的增效作用不显著;MP处理对茚虫威和毒死蜱增效
比为1.37和1.32,而对λ-高效氯氟氰菊酯的增效比仅为1.16。
2.微塑料暴露对斜纹夜蛾中肠解毒酶活性的影响
斜纹夜蛾中肠解毒酶活性结果显示,100mg/kg浓度的NP处理组的P450相对活
性(0.78)和100mg/kg的MP处理组的P450相对活性(0.64)均显著低于对照组(设
定为1)。100mg/kg浓度的NP、MP处理的UGT相对活性(0.71、0.72)显著低于
对照组(设定为1)。不同浓度的NP处理组的CarE相对活性与对照组没有显著差异,
而1、10、100mg/kg三种浓度的MP处理的CarE相对活性相对于对照组分别下降了
25%、22%、26%。三种浓度的NP、MP处理组的GST相对解毒酶活性与对照组差异
均不显著。
3.微塑料暴露对斜纹夜蛾中肠解毒酶基因表达量的影响
P450解毒酶基因表达量检测结果显示,与对照组相比,NP、MP能够抑制大部
分P450基因表达量。在所检测的27个P450基因中,有个25基因表达被NP处理所
抑制,有20个基因表达被MP处理所抑制。这其中包括多个已被证实参与解毒代谢
I
的P450亚家族,如CYP6B、CYP6AB、CYP6AE和CYP321A等。
转录因子CncC和MafK在斜纹夜蛾响应杀虫剂调控P450基因表达中发挥重要
作用,故检测了微塑料对CncC/MafK基因表达的影响。结果显示,浓度为1、10、100
mg/kg的NP处理组的CncC的相对表达量与对照组相比分别下降了36.9%、29.9%、
31.9%;MP处理组的表达量则下降了66.3%、59.1%、66.9%。同样三种浓度的NP
实验组的MafK的相对表达量与对照组相比分别下降了67.6%、63.3%、69.2%;MP
实验组的表达量则下降了73.9%、72.5%、93.7%。表明微塑料可能通过抑制CncC和
MafK的表达进而削弱P450介导的解毒代谢。
4.微塑料长期暴露对斜纹夜蛾的影响
为明确微塑料长期暴露对斜纹夜蛾的影响,使用微塑料(NP、MP;浓度1mg/kg)
连续处理斜纹夜蛾一个世代。结果显示,NP处理组的幼虫历期与对照组(CK)相比
下降了1.36%,而MP实验组的幼虫历期则延长了0.01倍。CK、NP、MP的化蛹率
分别为96%、98%、94.7%,三者之间没有显著差异。CK的蛹重为0.33g,NP、MP
实验组的蛹重相较于对照组上升了0.14、0.
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