霍乱弧菌检测PPT.ppt

关于霍乱弧菌检测PPT第1页，共23页，星期日，2025年，2月5日概况霍乱弧菌（V.cholera）是人类霍乱的病原体，霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。曾在世界上引起多次（7次）大流行。主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，死亡率甚高。属于国际检疫的烈性传染病。第2页，共23页，星期日，2025年，2月5日病原学霍乱弧菌属于弧菌科弧菌属，革兰染色阴性菌体短小，稍弯曲，两端钝圆，长1.5～2.0μm,宽0.3～0.4μm。菌体尾端有鞭毛，运动极为活泼，在暗视野显微镜下呈流星样运动，培养温度以37℃为最适宜，在碱性（PH8.8～9.0）肉汤或蛋白胨培养基上易于生长。第3页，共23页，星期日，2025年，2月5日

霍乱弧菌染色图片

革兰染色鞭毛染色第4页，共23页，星期日，2025年，2月5日分群和分型：根据O抗原的特异性，可将霍乱弧菌分成139个血清群。根据是否与O1抗血清凝集分两大群，O1群霍乱弧菌：凡能与O1群抗血清发生凝集非O1群霍乱弧菌：凡不被O1群抗血清凝集的。第5页，共23页，星期日，2025年，2月5日O1群霍乱弧菌的生物型1、古典生物型（前六次大流行）2、E1Tor生物型（第7次1961年来）。两个生物型具有相同的血清型。我国流行以ElTor霍乱弧菌为主。第6页，共23页，星期日，2025年，2月5日第7页，共23页，星期日，2025年，2月5日

O1群霍乱弧菌的血清分型型别别名O抗原成份原型稻叶型（Inaba）A、C异型小川型（Ogawa）A、B中间型彦岛型（Hikojima）A、B、C第8页，共23页，星期日，2025年，2月5日非O1群霍乱弧菌O139群霍乱弧菌1992年，在印度印度马德拉斯、泰米尔纳德发生的霍乱疫情，分离到的菌株不与O1群霍乱血清凝集，但是引起O1群霍乱的典型症状。引起WHO重视，定为O139群霍乱弧菌，被认为下一次霍乱大流行主角。第9页，共23页，星期日，2025年，2月5日O139的生物学特征：

生化特征与O1菌基本相同。含有与O1群霍乱弧菌相同毒力基因除O抗原不同外，其它性状均与EL-Tor生物型相似。毒力蛋白及其调控因子与El-Tor霍乱具有高度同源的编码。O139菌可以产生荚膜与O1群霍乱无交叉免疫力环境适应能力强耐药性强第10页，共23页，星期日，2025年，2月5日标本采集和送检1、粪便采集（1）采样应在发病早期，服用抗菌药物之前完成，并尽快送到检验室。粪便标本采集方法如下：用棉拭子采取自然排出的新鲜大便，也可用直肠棉拭或采便管由肛门插入直肠内3cm-5cm处采取，水样便采取1ml-3ml，成型便采取指甲大小的粪便量。病人的呕吐物，沾染粪便的衣服和用具，也可作为检材。第11页，共23页，星期日，2025年，2月5日（2）送检剧烈腹泻病人的水样便含有大量病菌，直接分离培养不难检出阳性。不能立即检查的，要接种于培养基内，尽快送往检验室。送检标本可放入（PH8.6-9.0）碱性蛋白胨水，也可放入文—腊二氏保存液或插入Cary-Blair二氏半固体保存培养基中。第12页，共23页，星期日，2025年，2月5日2、环境水体：水体的采样一般要求用灭菌的500ml水样瓶采集相对静止的30cm以内）500ml，加盖密封后在室温表层水。取水点的选择应结合流行病学调查等资料确定，同时，采样时应选择在水流平稳或静止处吸取。非疫情状态下的监测采样时间一般在清晨时，此时水体未受人群活动等因素影响。每个采样点中采样位置应相距数米、采集不少于2瓶做为平行检测。（20-25℃）下送实验室检测。第13页，共23页，星期日，2025年，2月5日3、水产品水生动物的采样通常选取活的或新鲜的水生动物为采集对象，有时也应考虑冰冻的水生动物，以无菌操作采集合适的部位，如鳃部和/或肠内容物等，置采样瓶（管）或食品采样袋密封，在常温下送检。有条件的采样点可将水生动物整体采回实验室再进行相关处置。同时，要求以无菌棉签涂抹五只（条）以上的某类水生动物体表、鳃及/或肛门，置碱性蛋白胨水送检，每管碱性蛋白胨水作一份样品看待。第14页，共23页，星期日，2025年，2月5日培养1先以碱性蛋白胨水（pH8.6）作为增菌液；再用强选择性分离培养基使用庆大霉素培养基或TCBS培养基或4号培养基；弱选择性培养基使用碱性琼脂或碱性胆盐。应注意不同厂商以及不同批号培养基的质量，每批培养基在使用前必须进行质量检测。第15页，共23页，星期日，2025年，2月5日培养2检样经碱性胨水37℃，8-12h增菌后，每份样品分别