灭菌及染菌的防治生.ppt

*发酵罐蒸汽蒸汽冷却水无菌培养基配料罐泵加热塔维持罐冷却管连续灭菌的基本设备一般包括（1）配料预热罐，将配制好的料液预热到60-70℃，以避免连续灭菌时由于料液与蒸汽温度相差过大而产生水汽撞击声；（2）连消塔，连消塔的作用主要是使高温蒸汽与料液迅速接触混和，并使料液的温度很快升高到灭菌温度（126-132℃）；（3）维持罐，连消塔加热的时间很短，光靠这段时间的灭菌是不够的，维持罐的作用是使料液在灭菌温度下保持5-7min，以达到灭菌的目的；（4）冷却管，从维持罐出来的料液要经冷却排管进行冷却，生产上一般采用冷水喷淋冷却，冷却到40-50℃后，输送到预先已灭菌的罐内。由连消塔、维持罐和冷却器组成的连消系统第30页，共68页，星期日，2025年，2月5日*可采用高温快速灭菌工艺，营养成分破坏的少；发酵罐非生产占用时间缩短，容积利用率提高；热能利用合理，适合实行自动化控制；不适合用于粘度大或固形物含量高的培养基的灭菌；增加一套连续灭菌设备，增多了操作环节，增加了染菌的几率。特点第31页，共68页，星期日，2025年，2月5日*分批灭菌与连续灭菌优点缺点连续灭菌1.高温短时灭菌，培养基营养成分损失少。2.发酵罐占用时间缩短，利用率高。?1.设备复杂，操作麻烦,染菌机会多。2.不适合含大量固体物料的灭菌。分批灭菌1.设备要求低，不需另外加热、冷却装置。2.操作要求低，适合小批量生产规模3.适合含大量固体物料灭菌1.培养基的营养物质损失大，灭菌后培养基质量下降2.发酵罐的利用率较低3.不适合大规模生产灭菌第32页，共68页，星期日，2025年，2月5日*分批灭菌连续灭菌实验室采用湿热灭菌法：121℃，20-30min大规模生产*第三节发酵罐的灭菌第33页，共68页，星期日，2025年，2月5日*第34页，共68页，星期日，2025年，2月5日*培养基的灭菌如果是采用连续灭菌法，则发酵罐应在加入灭菌的培养基前先行单独灭菌。通常是用蒸汽加热发酵罐的夹套或蛇管并从空气分布管中通入蒸汽，充满整个容器后，再从排气管中缓缓排出。容器内的蒸汽压力保持1公斤，20分钟。在保温结束后，关键是随即通入无菌空气，使容器保持正压，防止形成真空而吸入带菌的空气。第35页，共68页，星期日，2025年，2月5日**第四节空气除菌一、无菌空气的概述在发酵工业中，绝大多数是利用好气性微生物进行纯种培养，空气则是微生物生长和代谢必不可少的条件。无菌空气的制备就成为发酵工程中的一个重要环节。发酵工业应用的“无菌空气”是指通过除菌处理使空气中含菌量降低在一个极低的百分数，从而能控制发酵污染至极小机会。此种空气称为“无菌空气”。第36页，共68页，星期日，2025年，2月5日*空气中微生物的分布特点⑴不同地区：城市多，农村少；主风向多，上游少。⑵不同高度：位置越高，数量越少，所以采用高空采风一般每升高10米，微生物数量下降一个数量级。⑶不同季节：冬季少，夏季多，夏季约4000-6000个/立方米，为冬季的2倍。第37页，共68页，星期日，2025年，2月5日*辐射灭菌加热灭菌化学药品杀菌静电除菌介质过滤将有机体蛋白质变性而破坏其活力，从而杀灭空气中的微生物空气除菌：除去或者杀死空气中的微生物。二、空气除菌方法第38页，共68页，星期日，2025年，2月5日*二、空气除菌方法（一）辐射灭菌（二）化学杀菌用新洁尔灭，苯酚等喷洒或用甲醛熏蒸，硫磺熏蒸，进行空气灭菌，灭菌时间长，灭菌不彻底，空气湿度大，也只限于静止空间的灭菌。利用高能射线来进行灭菌，如紫外线，γ射线等，其杀菌时间长，只能用于静止空间的灭菌，如无菌室的灭菌，对于流动的空气效果差。第39页，共68页，星期日，2025年，2月5日*（三）加热灭菌加热灭菌即将空气加热到一定温度后，保温一定时间，将微生物杀死的方法。优点：加热灭菌效果迅速，如细菌芽胞。缺点：迅速加热和冷却费用高，周期长时，稳态难以维持。第40页，共68页，星期日，2025年，2月5日*利用高压20-50KV电压进行除菌，微生物的细胞与孢子大都带有电荷，即使不带电荷，在高压电场中也会被电离，带电的细胞或孢子在高压电场中被吸附，达到除菌的目的。该方法除菌能耗虽不高，每处理1000立方米空气仅耗电0.2-0.8KW，但所需的电压高，操作不安全，且除菌