实验DNA的粗提取课件(苏教版必修2).pptxVIP

实验DNA的粗提取

实验原理DNA提取的原理：DNA在NaCl溶液中的溶解度，随着NaCl浓度的变化而改变。DNA在物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

【实验链接】鸡血细胞中的DNA主要位于鸡血细胞核中，通常先向鸡血细胞液中加入蒸馏水，并搅拌，使细胞膜和核膜涨破，将DNA释放出来，然后用较高浓度的NaCl溶液溶解，再加入蒸馏水降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出。01DNA纯化的原理：DNA不溶于酒精，而细胞中某些物质可溶于酒精，从而可提取出含杂质较少的DNA。02

DNA纯化的原理：DNA不溶于酒精，而细胞中某些物质可溶于酒精，从而可提取出含杂质较少的DNA。【实验链接】实验中选用预冷的95%的酒精效果更好，除上述提取方法以外，还可以用苯酚，使蛋白质变性，抑制核酸酶的活性，通过离心分层后，DNA溶于上层水中，蛋白质变性存在于苯酚层中，使二者分开。

用品分析材料：鸡血实验中用鸡血作为实验材料有三个原因：一是鸡血中血细胞含量高，DNA含量丰富；二是材料易得；三是鸡血细胞极易吸水涨破。器具本实验过程中最好使用塑料烧杯和试管。因为玻璃表面带电荷，DNA中的磷酸基也带电荷，因而易被吸附于玻璃表面，故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。

试剂在DNA鉴定中所用的二苯胺是一种有毒性的试剂，在使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位，也不要近距离观察。

实验步骤

加入抗凝剂的目的制备鸡血细胞液时要在取新鲜鸡血的同时加入抗凝剂，防止血液凝固。实验中几次重复操作的目的实验中有两次使用蒸馏水第一次在第2步，目的是使血细胞吸水涨破；第二次在第4步，目的是为了稀释NaCl溶液，析出DNA。归纳提升

过滤时使用纱布层数与取其滤液或丝状物有关。第1、3次要其滤液，使用纱布为1～2层，第2次是要滤出丝状物，使用纱布为多层。目的都是为了获取较多的实验材料。02实验中有三次过滤01

01实验中有三次加NaCl溶液02在步骤3中加入NaCl溶液，必须充分搅拌，加速染色质中的DNA与蛋白质分离，使DNA充分游离并溶解在NaCl溶液中。03在步骤6中加入NaCl溶液的目的也是为了DNA的再溶解，不过这时溶液中蛋白质含量已很少。04在步骤9中，加入NaCl溶液的浓度比前两次低得多，但还是为了溶解DNA。

实验中有6次搅拌除第一次搅拌外，后面5次搅拌均要朝向一个方向，并且在析出DNA、DNA再溶解和提取中，搅拌都要轻缓，玻璃棒不要直插入烧杯底部，防止DNA分子断裂。

logo【例题展示】关于“DNA的粗提取”实验，部分步骤如图所示。

实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中含有较高含量的__________________。01如图A所示实验步骤中加蒸馏水的目的是____________________；通过图B所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入2mol/LNaCl溶液的目的是________________；图C所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是_______________。02为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可滴加____________溶液，________加热后，丝状物被染成____________色。03

【解析】实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，是因为DNA存在于细胞中，而在血浆中含有较多的蛋白质等物质，不利于DNA的提取。在DNA的提取过程中，两次加入蒸馏水，其作用不同。第一次加水是为了使血细胞吸水涨破，第二次加水是为了稀释NaCl溶液，因为将蛋白质和DNA分离后，在较高浓度的NaCl溶

液中，染色质或染色体中的蛋白质容易解聚，这样DNA就游离出来，向含有DNA的浓度较高的NaCl溶液中加入大量蒸馏水，稀释NaCl溶液，DNA的溶解度会下降，当NaCl溶液浓度为0.14mol/L时溶解度最低，从而析出DNA。

【答案】(1)DNA使血细胞吸水涨破溶解DNA使NaCl的物质的量的浓度降到0.14mol/L，从而使DNA析出二苯胺沸水浴蓝

【实验演练】(2011年高考江苏卷)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是()用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，滤去析出物调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同

解析：选B。用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，过滤后获取析出物，A项错误；实验时可用不同浓度的NaCl溶液去除杂质(DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同)，或用木瓜蛋白酶溶解蛋白质，从而去除部分杂质，B项正确；DN