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鸡毒支原体套式PCR检测技术的开发与应用

鸡毒支原体套式PCR检测技术的开发与应用（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．4

一、内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

（一）背景介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

（二）研究意义与价值．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

（一）实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

（二）主要试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

（三）实验设计与步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

（四）数据分析与处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

三、鸡毒支原体套式PCR检测技术原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

（一）支原体概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

（二）PCR技术简介．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

（三）套式PCR检测原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

四、鸡毒支原体套式PCR检测操作流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

（一）样本采集与处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

（二）PCR反应体系配制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

（三）PCR扩增与检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

（四）结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

五、鸡毒支原体套式PCR检测技术的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

（一）临床样品检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

（二）动物疫源追踪．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

（三）疫苗研发与效果评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

六、鸡毒支原体套式PCR检测技术的优化与改进．．．．．．．．．．．．．．．．．27

（一）引物设计与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

（二）探针选择与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

（三）反应条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

（四）灵敏度与特异性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

七、鸡毒支原体套式PCR检测技术的挑战与前景．．．．．．．．．．．．．．．．．35

（一）技术挑战与解决方案．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

（二）应用前景展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

（三）未来发展方向．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

八、结论与致谢．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

鸡毒支原体套式PCR检测技术的开发与应用（2）．．．．．．．．．．．．．．．．40

内容综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

1.3研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

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