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ICS11.220
CCSB41
5304
玉溪市地方标准
DB5304/T059—2023
动物疫病监测采样技术规范
玉溪市市场监督管理局
发布
DB5304/T059—2023
前
言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由玉溪市动物疫病预防控制中心提出。
本文件由玉溪市农业农村局归口。
本文件起草单位:玉溪市动物疫病预防控制中心
本文件主要起草人:杨耀兰、吕嵘、宋诗雅、罗晓燕、杨秋楠、李晶、徐聪、张晓舟、赵明丽、吴
明伟、荚洪涛、杨曦、魏建宏。
I
DB5304/T059—2023
动物疫病监测采样技术规范
1
范围
本文件规定了动物疫病监测样品的采样原则、采样准备、样品采集与处理、样品记录、样品保存、
样品运送与包装、废弃物无害化处理等技术内容。
本文件适用于兽医诊断、疫情监测、畜禽疫病防控和免疫效果评价等动物疫病实验室检测所需样品
(病料)的采集、保存和运送。
2
规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
NY/T541
兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
3
术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
按照规定的程序和要求,从动物或环境取得一定量的样本,并经过适当的处理,留做待检样品的过
4
——诊断或被动监测时,根据不同疫病或检测目的,采集1~3头(只)病死或濒死动物相应样品,
病料必须具有代表性(见附录A)。
1
DB5304/T059—2023
——用于流行病学调查、抗体监测、动物群体健康评估等样品,数量、种类、分布等要满足流行
病学调查和生物统计学的要求。
——采集死亡动物病料,应于动物死亡后2小时内采集;无法完成时,夏天不得超过6小时,冬
天不得超过24小时。
——采样过程应注意无菌操作,所需器具均应事先严格灭菌。
——活体动物采样时,应避免过度刺激或损害动物。
——做好个人安全防护、环境消毒和病害肉尸的无害化处理。
5
采样准备
5.1
人员准备
采样人员应熟练掌握采样工作程序和采样操作技术,做好个人安全防护。
5.2
器械和物品
5.2.1
保定器械
保定器(绳)、牛鼻钳、口笼等。
5.2.2
工具物品
采样箱(或冷藏箱)、解剖刀、手术剪、镊子、钢锯、骨剪、探杯、酒精灯、酒精棉、注射器、一
次性采血针、离心管、试管、试管架、平皿、样品袋、玻片、无菌棉拭子、冰袋、封条、废弃物袋等。
5.3
6
6.1
——兔:耳背静脉、颈静脉或心脏采血;
2
DB5304/T059—2023
6.1.2
血样处理
6.1.2.1
血清样品
分离血清的样品不加抗凝剂,采集全血3~5mL置于采血管中,在室温(20℃~25℃)静置,待血液
凝固,血清自然析出或进行离心分离,收集备用。若需长时间保存,应将血清置-20℃以下保存,且应
避免反复冻融。
6.1.2.2
全血样品
采样前样品容器中加入抗凝剂,充分摇匀,低温备用。抗凝剂可用乙二胺四乙酸(EDTA,PCR检测
血样首选抗凝剂)、0.1%肝素钠、阿氏液(见附录C.1,2份阿氏液可抗1份血液)、3.8%~4%枸橼酸钠
溶液(0.1mL可抗1mL血液)等。全血样品采集3~5mL。
6.1.2.3
血浆样品
样品容器内先加入抗凝剂(同全血样品),采集全血3~5mL后摇匀,然后静置,待红细胞自然下沉
或离心沉淀后,取上清液即为血浆。
6.2
组织样品
6.2.1
病原分离样品
以无菌技术采集淋巴结、肝脏、肾、脾、胰腺、心、肺等组织样品(大约2cm~5cm),分别放入
33
灭菌容器或样品袋内。
选取典型、明显的病变部位,连同健康组织一同切下,立即放入不低于10倍于组织块的10%福尔
马林溶液(见附录C.7)中固定。固定器具避免使用金属材质,组织块厚度不超过0.5cm,体积在2cm
。组织块切忌挤压、刮摸和用水洗。如作冷冻切片用,则将组织块放在0℃~4℃容器中,尽快送往
3
~
3
无菌采集2g病变的上皮组织或水泡皮(坏死组织、痂皮、丘疹、结节、脓包等)置于25%~50%甘油
生理盐水缓冲液(加双抗)(见附录C.6)。未破裂的水泡,用灭菌注射器或其他器具抽取水泡液,装
入灭菌容器中送检。若水泡皮表面有污物,用清水清洗,切忌使用酒精、碘酒等消毒剂消毒、擦拭。
拔取毛发或绒毛样品,用于检查体表的螨虫、跳蚤和真菌感染。用解剖刀片沿边缘刮取的表层皮屑
脑、脊髓样品
3
DB5304/T059—2023
较小动物,取整个头部,无菌纱布包裹并密封待用;较大动物,采取开颅无菌取样、用采样
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