一种靶向基因载体及其制备方法和应用ZL.201610339273.8.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN106047935A

(43)申请公布日

2016.10.26

(21)申请号201610339273.8

(22)申请日2016.05.20

(71)申请人中国科学院深圳先进技术研究院

地址518055广东省深圳市南山区西丽大

学城学苑大道1068号

(72)发明人赵晓丽郑楚萍

(74)专利代理机构广州三环专利代理有限公司

44202

代理人郝传鑫熊永强

(51)Int.Cl.

C12N15/88(2006.01)

A61K48/00(2006.01)

权利要求书2页说明书11页附图3页

(54)发明名称

一种靶向基因载体及其制备方法和应用

(57)摘要

本发明提供了一种骨靶向基因载体，所述骨

靶向基因载体为阿仑膦酸钠改性的脂质体，所述

阿仑膦酸钠改性的脂质体包括阳离子类脂、中性

辅助类脂、胆固醇以及阿仑膦酸钠改性的磷脂，

所述阳离子类脂、中性辅助类脂、胆固醇构成磷

脂层，所述阿仑膦酸钠改性的磷脂穿插于所述磷

脂层中并与所述磷脂层形成囊泡结构，所述阿仑

膦酸钠暴露在所述磷脂层之外。该骨靶向基因载

体对骨组织有较高的靶向性和转染效率，可以负

载基因物质在骨组织附近高效表达。本发明还提

供了该骨靶向基因载体的制备方法及应用。

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CN106047935A权利要求书1/2页

1.一种骨靶向基因载体，其特征在于，所述骨靶向基因载体为阿仑膦酸钠改性的脂质

体，所述阿仑膦酸钠改性的脂质体包括阳离子类脂、中性辅助类脂、胆固醇以及阿仑膦酸钠

改性的磷脂，所述阳离子类脂、中性辅助类脂、胆固醇构成磷脂层，所述阿仑膦酸钠改性的

磷脂穿插于所述磷脂层中并与所述磷脂层形成囊泡结构，所述阿仑膦酸钠暴露在所述磷脂

层之外。

2.如权利要求1所述的骨靶向基因载体，其特征在于，所述阿仑膦酸钠改性的磷脂包括

聚乙二醇衍生化磷脂和通过酰胺键与聚乙二醇衍生化磷脂连接的阿仑膦酸钠。

3.如权利要求1所述的骨靶向基因载体，其特征在于，所述骨靶向基因载体的粒径为

40-200nm。

4.如权利要求1所述的骨靶向基因载体，其特征在于，所述阿仑膦酸钠改性的磷脂与所

述阳离子类脂、中性辅助类脂、胆固醇的摩尔比为(0.01-0.07)：(1-3)：(0.5-1)：(0.1-1)。

5.如权利要求1所述的骨靶向基因载体，其特征在于，所述阳离子类脂包括(2,3-二油

酰基-丙基)-三甲基氯化铵、(2,3-二油氧基丙基)三甲基氯化铵和双十八烷基二甲基溴化

胺中的一种或多种；所述中性辅助类脂包括二油酰磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰胆碱中的

一种或两种。

6.如权利要求2所述的骨靶向基因载体，其特征在于，所述聚乙二醇衍生化磷脂是由聚

乙二醇通过共价键和磷脂类物质相连得到，所述聚乙二醇分子的分子量为200～20000道尔

顿。

7.一种骨靶向基因载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将聚乙二醇衍生化磷脂溶于第一溶剂，并加入催化剂、脱水剂活化，再加入溶解在

第一溶剂中的阿伦膦酸钠，在室温下进行酰胺化反应8-12h，得到反应液，将所述反应液经

分离纯化后进行冷冻干燥，得到阿仑膦酸钠改性的磷脂，其中，所述聚乙二醇衍生化磷脂的

羧基与阿仑膦酸钠的氨基的摩尔比为(1-10):1；

(2)取上述阿仑膦酸钠改性的磷脂，与阳离子类脂、中性辅助类脂、胆固醇加入到反应

器中，加入有机溶剂，混合均匀后得到第一混合溶液