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GDF9基因在不同产羔数藏羊中的功能表达研究

目录

GDF9基因在不同产羔数藏羊中的功能表达研究（1）．．．．．．．．．．．．．．3

研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1藏羊产羔数与遗传因素的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2GDF9基因在羊生长发育中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.3研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.1GDF9基因的功能概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.2GDF9基因在动物生长发育中的应用研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.3藏羊产羔数相关基因的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

3.1研究材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

3.1.1藏羊品种选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

3.1.2样本采集与处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.2实验设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.2.1分组与对照设置．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

3.2.2数据收集与分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

3.3GDF9基因检测与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

3.3.1基因提取与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

3.3.2PCR扩增与测序．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

3.3.3基因表达水平分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

4.1GDF9基因在不同产羔数藏羊中的表达差异．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

4.1.1基因型频率分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

4.1.2基因表达水平比较．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

4.2GDF9基因多态性与产羔数的相关性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

4.2.1遗传连锁分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

4.2.2多因素分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

4.3GDF9基因功能验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

4.3.1细胞培养与基因转染．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

4.3.2生物学功能实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

GDF9基因在不同产羔数藏羊中的功能表达研究（2）．．．．．．．．．．．．．36

研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

1.1藏绵羊产业现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

1.2GDF9基因与产羔数的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

1.3研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

2.1研究对象与分组．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

2.2样本采集与处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．