6食品安全沙门氏菌检验.pptx

中华人民共和国国家标准

犌B4789．4—2016

食品安全国家标准

食品微生物学检验沙门氏菌检验

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局

2016-12-23发布

2017-06-23实施

发布

犌B4789．4—2016

前言

本标准代替GB4789．4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》、SN0170—1992《出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法》、SN／T2552．5—2010《乳及乳制品卫生微生物学检验方法第5部分：沙门氏菌检验》。

整合后的标准与GB4789．4—2010相比，主要变化如下：

—修改了检测流程和血清学检测操作程序；

—修改了附录A和附录B。

Ⅰ

食品安全国家标准

食品微生物学检验沙门氏菌检验

1范围

本标准规定了食品中沙门氏菌(犛almonela)的检验方法。

本标准适用于食品中沙门氏菌的检验。

2设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

2．1冰箱：2℃~5℃。

2．2恒温培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃。

2．3均质器。

2．4振荡器。

2．5电子天平：感量0．1g。

2．6无菌锥形瓶：容量500mL，250mL。

2．7无菌吸管：1mL(具0．01mL刻度)、10mL(具0．1mL刻度)或微量移液器及吸头。2．8无菌培养皿：直径60mm，90mm。

2．9无菌试管：3mm×50mm、10mm×75mm。

2．10pH计或pH比色管或精密pH试纸。

2．11全自动微生物生化鉴定系统。

2．12无菌毛细管。

3培养基和试剂

3．1缓冲蛋白胨水(BPW)：见A．1。

3．2四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液：见A．2。

3．3亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液：见A．3。

3．4亚硫酸铋(BS)琼脂：见A．4。

3．5HE琼脂：见A．5。

3．6木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂：见A．6。

3．7沙门氏菌属显色培养基。

3．8三糖铁(TSI)琼脂：见A．7。

3．9蛋白胨水、靛基质试剂：见A．8。

3．10尿素琼脂(pH7．2)：见A．9。

3．11氰化钾(KCN)培养基：见A．10。

3．12赖氨酸脱羧酶试验培养基：见A．11。

3．13糖发酵管：见A．12。

3．14邻硝基酚β-D半乳糖苷(ONPG)培养基：见A．13。

3．15半固体琼脂：见A．14。

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3．16丙二酸钠培养基：见A．15。

3．17沙门氏菌O、H和Vi诊断血清。

3．18生化鉴定试剂盒。

4检验程序

沙门氏菌检验程序见图1。

图1沙门氏菌检验程序

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5操作步骤

5．1预增菌

无菌操作称取25g(mL)样品，置于盛有225mLBPW的无菌均质杯或合适容器内，以8000r／min~10000r／min均质1min~2min，或置于盛有225mLBPW的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min~2min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需调整pH，用1mol／L无菌NaOH或HCl调pH至6．8±0．2。无菌操作将样品转至500mL锥形瓶或其他合适容器内(如均质杯本身具有无孔盖，可不转移样品)，如使用均质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培养8h~18h。

如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min，或2℃~5℃不超过18h解冻。

5．2增菌

轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL，转种于10mLTTB内，