食品安全创伤弧菌检验.pptx

中华人民共和国国家标准

犌B4789．44—2020

食品安全国家标准

食品微生物学检验创伤弧菌检验

2020-09-11发布2021-03-11实施

中华人民共和国国家卫生健康委员会发布

国家市场监督管理总局

犌B4789．44—2020

食品安全国家标准

食品微生物学检验创伤弧菌检验

1范围

本标准规定了水产品中创伤弧菌(Vibriovulnificus)的检验方法。

本标准适用于鱼、虾、蟹、贝类等水产品中创伤弧菌的检验。

2设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

2．1恒温培养箱：36℃±1℃。

2．2冰箱：2℃~5℃、7℃~10℃。

2．3恒温水浴锅。

2．4均质器或无菌研钝。

2．5天平：感量0．1g。

2．6PCR仪。

2．7电泳仪或毛细管电泳仪。

2．8凝胶电泳成像系统或紫外检测仪。

2．9生物安全柜。

2．10高速离心机(最大转速至少15000r／min)。

2．11涡旋振荡器。

2．12微量可调移液器(量程2．5μL、10μL、100μL、1000μL)及配套吸头。

2．13精密pH试纸或pH计。

2．14无菌试管：规格18mm×180mm和15mm×100mm。

2．15无菌吸管：规格1mL(具0．01mL刻度)和10mL(具0．1mL刻度)。

2．16无菌锥形瓶：容量250mL、500mL和1000mL。

2．17无菌培养皿：直径90mm。

2．18无菌手术剪、镊子、钳子等。

2．19PCR反应管。

培养基和试剂

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3．1蛋白陈-氯化钠-纤维二糖-多貓菌素E(PNCC)增菌液：见A．1。

3．2纤维二糖-多貓菌素E(CC)琼脂培养基：见A．2。

3．3改良纤维二糖-多貓菌素B-多貓菌素E(mCPC)琼脂培养基：见A．3。

3．43％氯化钠胰蛋白陈大豆琼脂培养基：见A．4。

3．5磷酸盐缓冲液(PBS)：见A．5。

3．63％氯化钠三糖铁琼脂斜面：见A．6。

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3．7嗜盐性试验培养基：见A．7。

3．83％氯化钠赖氨酸脱赖购试验培养基：见A．8。

3．93％氯化钠MR-VP培养基：见A．9。

3．103％氯化钠溶液：见A．10。

3．11氧化购试剂：见A．11。

3．12革兰氏染色液：见A．12。

3．13邻硝基吩-β-D-半乳糖昔(ONPG)试剂：见A．13。

3．14Voges-Proskauer(V-P)试剂：见A．14。

3．15细菌DNA提取试剂盒。

3．16生化鉴定试剂盒。

3．17PCR反应配套试剂。

3．18琼脂糖凝胶电泳配套试剂。

3．19具有菌种保藏资质单位提供的创伤弧菌标准菌株。

检验程序

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创伤弧菌检验程序见图1