食品安全单核细胞增生李斯特氏菌检验.pptx

食品安全国家标准

食品微生物学检验

单核细胞增生李斯特氏菌检验

中华人民共和国国家标准

GB4789.30—2016

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局

2016-12-23发布

2017-06-23实施

发布

本标准代替GB4789.30—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验菌检验》。

本标准与GB4789.30—2010相比,主要变化如下:

—增加了“第二法单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法”;

—增加了“第三法单核细胞增生李斯特氏菌MPN计数法”;

—修改了范围。

单核细胞增生李斯特氏

前言

GB4789.30—2016

Ⅰ

1范围

本标准规定了食品中单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的检验方法。

本标准第一法适用于食品中单核细胞增生李斯特氏菌的定性检验;第二法适用于单核细胞增生李斯特氏菌含量较高的食品中单核细胞增生李斯特氏菌的计数;第三法适用于单核细胞增生李斯特氏菌含量较低(100CFU/g)而杂菌含量较高的食品中单核细胞增生李斯特氏菌的计数,特别是牛奶、水以及含干扰菌落计数的颗粒物质的食品。

2设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:

2.1冰箱:2℃~5℃。

2.2恒温培养箱:30℃±1℃、36℃±1℃。

2.3均质器。

2.4显微镜:10x~100x。

2.5电子天平:感量0.1g。

2.6锥形瓶:100mL、500mL。

2.7无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。

2.8无菌平皿:直径90mm。

2.9无菌试管:16mm×160mm。

2.10离心管:30mm×100mm。

2.11无菌注射器:1mL。

2.12单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)ATCC19111或CMCC54004,或其他等效标准菌株。

2.13英诺克李斯特氏菌(Listeriainocua)ATCC33090,或其他等效标准菌株。

2.14伊氏李斯特氏菌(Listeriaivanovi)ATCC19119,或其他等效标准菌株。

2.15斯氏李斯特氏菌(Listeriaseligeri)ATCC35967,或其他等效标准菌株。

2.16金黄色葡萄球菌(Staphylococusaureus)ATCC25923或其他产β-溶血环金葡菌,或其他等效标准菌株。

2.17马红球菌(Rhodococusequi)ATCC6939或NCTC1621,或其他等效标准菌株。

2.18小白鼠:ICR体重18g~22g。

2.19全自动微生物生化鉴定系统。

3培养基和试剂

3.1含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB-YE):见A.1。

食品安全国家标准

食品微生物学检验

单核细胞增生李斯特氏菌检验

GB4789.30—2016

1

3.2含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE):见A.2。

3.3李氏增菌肉汤LB(LB1,LB2):见A.3。

3.41%盐酸吖啶黄(acriflavineHCl)溶液:见A.3.2.1、A.3.2.2。

3.51%萘啶酮酸钠盐(naladixicacid)溶液:见A.3.2.1、A.3.2.2。

3.6PALCAM琼脂:见A.4。

3.7革兰氏染液:见A.5。

3.8SIM动力培养基:见A.6。

3.9缓冲葡萄糖蛋白胨水[甲基红(MR)和V-P试验用]:见A.7。

3.105%~8%羊血琼脂:见A.8。

3.11糖发酵管:见A.9。

3.12过氧化氢试剂:见A.10。

3.13李斯特氏菌显色培养基。

3.14生化鉴定试剂盒或全自动微生物鉴定系统。

3.15缓冲蛋白胨水:见A.11。

第一法单核细胞增生李斯特氏菌定性检验

单核细胞增生李斯特氏菌定性检验程序见图1。

图1单核细胞增生李斯特氏菌定性检验程序

GB4789.30—2016

4