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中华人民共和国国家标准

GB1886.299—2018

食品安全国家标准

食品添加剂冰结构蛋白

中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局

2018-06-21发布

2018-12-21实施

发布

GB1886.299—2018

食品安全国家标准

食品添加剂冰结构蛋白

1范围

本标准主要适用于以大豆为原料，经酵母(SacharomyceScereviSiae)发酵培养，再经分离、浓缩、精制得到的食品添加剂冰结构蛋白。

2技术要求

2.1感官要求

感官要求应符合表1的规定。

表1感官要求

项目

指标

检验方法

冰结构蛋白(ISP)含量/(g/L)

5

附录A中A.3

灰分，w/%

2

GB5009.4

pH

2.5~3.5

附录A中A.4

铅(Pb)/(mg/L)

2.0

GB5009.75或GB5009.12

注：测定各指标前，试样应于4C下解冻约20h，并搅拌均匀。

项目

要求

检验方法

色泽

浅棕色

将适量试样置于清洁、干燥的烧杯中，在自然光线下，观察其色泽和状态

状态

液体

注：测定各指标前，试样应于4C下解冻约20h，并搅拌均匀。

2.2理化指标

理化指标应符合表2的规定。

表2理化指标

2.3微生物指标

微生物指标应符合表3的规定。

1

项目

指标

检验方法

菌落总数/(CFU/mL)

A

3000

GB4789.2

大肠菌群/(CFU/mL)

A

10

GB4789.3

霉菌和酵母菌/(CFU/mL)A

100

GB4789.15

沙门氏菌/25mL

不得检出

GB4789.4

单核细胞增生李斯特氏菌/25mL

不得检出

GB4789.30

蜡样芽抱杆菌/(CFU/mL)A

100

GB4789.14

注：测定各指标前,试样应于4C下解冻约20h,并搅拌均匀。

产品应在—18C以下储存。

表3微生物指标

GB1886.299—2018

3储存条件

2

附录A

检验方法

A.1一般规定

本标准所用试剂和水在未注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂和制品在未注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602和GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.2鉴别试验

A.2.1液相色谱法

在冰结构蛋白(ISP)含量测定试验中，试样溶液色谱图的主峰保留时间应和标准溶液色谱图的主峰保留时间相一致，参见附录B中图B.1。

A.2.2质谱法

分别配制10mg/L的试样溶液和标准溶液，在附录C参考质谱条件下进行测定，两者的分子量应一致，参见附录B中图B.2。

A.3冰结构蛋白(ISP)含量的测定

A.3.1试剂和材料

A.3.3.1色谱柱:C18反相色谱柱(+4.6mmx15cm)，填料直径3.5um；或其他等效的色谱柱。A.3.3.2检测波长:214nm。

A.3.3.3柱温:室温。

A.3.3.4流速:1.0mL/min。

A.3.3.5进样量:20.0uL。

A.3.3.6流动相A:0.05%三氮乙酸水溶液(体积分数)；流动相B:0.05%三氮乙酸乙睛溶液(体积分数)。

A.3.3.7流动相梯度洗脱参数见表A.1。

高效液相色谱仪:带二极管阵列检测器。微量进样器:100.0uL。

0.45um水相滤膜。

乙睛:色谱纯。

三氮乙酸:纯度自98%。

冰结构蛋白对照品:纯度自10%。

A.3.1.1A.3.1.2A.3.1.3

A.3.2.1A.3.2.2A.3.2.3

A.3.3参考色谱条件

A.3.2仪器和设备

GB1886.299—2018

3

A.3.4分析步骤

A.3.4.1标准溶液系列的制备

称取适量冰结构蛋白对照品溶解于水,分别配制实际浓度为50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L和250mg/L的标准溶液系列,用0.45um水相滤膜过滤。

A.3.4.2试样溶液的制备

移取搅拌均匀试样0.5mL,用水定容至25mL,用0.45um水相滤膜过滤。

A.3.4.3测定

在A.3.3参考色谱条件下,分别对标准溶液系列和试样溶液进行测定,得到冰结构蛋白标准溶液浓度和响应值(峰高或峰面积)的曲线,