动物细胞培养课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

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2.2动物细胞工程

动物细胞培养(第一课时);

动物细胞工程常用的技术：

动物细胞培养——动物细胞工程的基础动物细胞融合

动物细胞核移植;

从动物体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后

在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

原理：细胞增殖(有丝分裂);

一、动物细胞培养的条件

1.营养

(1)培养基构成：合成培养基十血清等一些天然成分

合成培养基：将细胞所需的营养物质(糖类、氨基酸、无机盐、

维生素等)按种类和所需量严格配制的培养基。

血清等一些天然成分：含有尚未全部研究清楚的

细胞所需的营养物质;

2.无菌、无毒的环境

(1)对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。

(2)在无菌环境下进行操作。

另外：可根据实际情况适量添加抗生素。

(3)培养液需要定期更换：

清除代谢物，防止细胞代谢物积累

对细胞自身造成危害。;

3.温度、pH和渗透压与相应动物内环境的理化性质保持一致。

(1)适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5℃为宜；

(2)适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为_;

(3)适宜的渗透压：目的维持细胞正常的形态和功能;

(2)具体操作：通常采用培养皿或松盖培养瓶。

置于含有95%空气和5%CO?的混合气体的CO?培养箱中进行培养。;

一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。

(2)取材原因：

细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养;

用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间

②原因：成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖一是能使细胞与培养液充分接触，保证细胞所需要的营养供应；

二是能保证细胞内有害代谢物的及时排出。

(2)用培养液将细胞制成细胞悬液。

将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内，置于适宜环境中???行原代培养。;

二、动物细胞培养的过程

思考1:进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明

细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?

用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。

胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时，胃蛋白酶就会

失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。

思考2:胰蛋白酶会把细胞膜蛋白分解掉吗?

可能会控制好作用时间;

二、动物细胞培养的过程

3.体外培养的动物细胞类型

①悬浮生长类：能够悬浮在培养液中生长增殖。

②贴壁生长类：

需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。

大多数细胞属于这种类型。;

二、动物细胞培养的过程

①细胞贴壁：大多数细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁。

影响贴壁类细胞生长分裂的因素：

一方面会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。;

二、动物细胞培养的过程

4.分瓶、进行传代培养

(1)收集细胞

①悬浮生长类：直接用离心法收集

②贴壁生长类：

重新用胰蛋白酶等处理，使之分散

成单个细胞，然后再用离心法收集

(2)将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养;

①原代培养：

通常将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养。

②传代培养：

将分瓶后的细胞培养成为传代培养。;

取动物组织

机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理

分散成单个细胞

制成细胞悬液

转入培养液进行原代培养

细胞贴壁个接触抑制

分瓶

进行传代培养;

比较项目;

(1)动物细胞培养体现了动物细胞的全能性X)

(2)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞)

(3)悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再用离心法收集(

(4)动物细胞培养时，O?是细胞代谢所必需的，CO?的主要作用是维持

培养液的pH;

1.干细胞的概念：

动物和人体内仍保留着少数具有分裂和分化能力

的细胞，这些细胞叫做干细胞。

在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。

2.干细胞的来源：

存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。

3.干细胞的类型：

包括胚胎干细胞和成体干细胞等。;

4.胚胎干细胞(简称ES细胞)

①分布：存在于早期胚胎中

具有分化为成年动物体内的任何一种

②特点：类型的细胞，并进一步形成机体的所

有组织和器官甚至个体的潜