植物组织培养-4植物器官培养.ppt

5.1胚培养成熟胚培养幼胚培养成熟胚培养较容易表面消毒培养基：含无机盐和糖，如White、Tukey、Randolph。光照：12h/d；温度：25～30℃。具有休眠习性的种子（苹果、桃等），接种后4℃预处理一段时间后再转入常温培养。幼胚培养的生长方式正常胚胎发育，维持胚性生长。早熟萌发：迅速萌发为幼苗，不能维持胚性生长。此幼苗畸形瘦弱，易死亡，应避免。胚胎发育过程异养期：球形期以前，需复杂培养基。自养期：心形期开始，可用简单培养基。异养期易夭折，可采用胚乳看护培养，提高成功率，1％到30％～40％。看护培养看护培养（nurseculture）Muir等1954年设计。生长过旺：茎尖明显增大，基部产生愈伤组织，茎尖难于伸长，色泽较淡。生长素偏高用了2,4-D光照太弱温度过高生长正常：茎尖逐渐转绿，基部逐渐膨大，有时形成少量愈伤组织，茎尖逐渐伸长，最终形成小枝。影响茎尖微繁的因素基因型外植体的大小供试植株的生理状态芽的着生部位褐变玻璃化极性后生变化形态发生能力遗传稳定性4.3叶的培养离体叶：叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织。意义：研究叶形态建成、光合作用、叶绿体形成等；叶细胞全能性；原生质体融合；无性繁殖系；诱变育种。影响叶组织培养的因素基因型细胞分裂素细胞分裂素和生长素的组合供试植株的发育时间和叶龄叶脉极性损伤离体叶组织发育途径直接产生不定芽由愈伤组织产生不定芽胚状体其他将镊子、解剖刀置于含有70％酒精的清洁瓶内。叶片浸于该液1分钟作表面消毒。将叶片置于10％漂白粉水溶液中（1/4杯漂白粉+2?杯水+几滴洗洁精）10分钟，并不时用镊子搅动。如果叶片浮在水上，则需用镊子夹入水底。10分钟后，将漂白粉水溶液中的叶片转移到盛有无菌水的瓶子内，一次放入一片。将叶片转移到消毒过的盘上准备切割。切去叶的边缘，再将剩下的叶片切成2－4片，并分别将它们接入紫罗兰培养基上。经消毒的非洲紫罗兰叶片切成0.5-1英寸宽，接种与新鲜的培养基上。3周后叶片周围及表面肿胀，并有芽生成。芽伸长成苗。有时叶片表面都被诱导的芽所包围。接种5－6周后将接种的叶片1分2，并转入无激素的培养基中以利于苗的生长及生根。一个即将用于移栽的生根的紫罗兰试管苗。移栽到土壤中的小苗的前几天要用塑料袋罩上，直到小苗适应低湿度的环境。复习思考题植物根培养主要有哪几种方法？什么是茎段培养？有何特点及用途？何谓茎尖培养？有何类型？需注意什么？叶培养有哪些意义？5植物胚胎培养植物胚胎培养是指对植物的胚、胚乳、胚珠和子房等进行离体培养，使其发育成完整植株的技术。包括：胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。种皮子叶胚芽胚轴残存胚乳胚根胚柄胚乳种皮子叶胚芽鞘胚芽胚根胚柄双子叶植物种子单子叶植物种子种子的构造4植物器官培养植物器官培养是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。根、茎、叶、花器、果实、种子。4.1根的培养根系生理代谢研究的良好实验体系；研究器官分化、形态建成的良好体系；建立根无性系，用于制药；诱变育种。4.1.1离体根的培养方法固体培养法：平放液体培养法：振荡固体－液体双层培养法：根段形态学上端插入固体培养基，下端朝上浸露在液体培养基中。其他特殊方法4.1.2离体根所用培养基WhiteMS、B5等大量元素减半或减2/34.1.3影响离体根生长因素基因型营养条件：氮源、碳源、微量元素、维生素B1激素：生长素pH光照和温度：一般黑暗有利于根的形成。4.2.1茎段培养植物茎段培养是指对植物的带有一个以上定芽或不定芽的外植体（包括块茎、球茎、鳞茎在内的幼茎切段）进行离体培养的技术。4.2茎段和茎尖培养茎段培养的目的进行植物的离体快速繁殖。研究茎细胞的分裂潜力和全能性。诱导细胞变异和突变体的获得。茎段培养的特点和优点特点：以芽生芽的方法进行增殖。优点：容易成功、变异小、性状均一、繁殖速度快。茎段培养产物单苗（芽）丛生苗（芽）单生芽和丛生芽的增殖方式适宜植物的离体快速繁殖。完整植物愈伤组织影响因素基因型激素配比：生长素、细胞分裂素4.2.2茎尖培养茎尖培养（shoottipcultureorapicalmeristemculture）是指对植物顶端的原分生组织和它衍生的分生组织的培养。材料茎尖分生组织培养：1mm(带有1－2个叶原基的生长锥），可去毒。普通茎尖培养：几毫米至几十毫米的茎尖、芽尖及侧芽培养。Shoottipcul