植物组织培养无病毒苗培养.ppt

第六章

无病毒植物的培养;教学目的和规定;

第一节植物病毒的危害和培养无病毒植物的意义

;一、植物病毒的危害;病毒症状;6;危害园艺植物的病毒数目;如侵染菊花的病毒和类病毒有19种之多;4种病毒对草莓生产导致重大影响:

斑驳病毒（SMoV）

草莓黄边病毒（SMYEV）

草莓镶脉病毒（SVBV）

草莓皱缩病毒（SCrV）、;甘薯根腐病.;2.病毒的特性及其侵染;３.植株脱病毒的意义;脱毒苗;病毒活力与温度的关系;

第二节脱除植物病毒的原理及措施

;1.热处理脱除植物病毒的原理;（1）温汤浸渍处理法：将剪下的接穗或种植材料，在50℃左右的温水中，浸渍3-15分钟至数小时。

（2）热风处理法：让盆载植物在35-40℃高温下生长发育，热处理空气温度应逐渐升高，然后到达所需温度，同步必须保持一定的湿度和光照，后来可切取处理后新长出的枝条作接穗和砧木，或将热处理与组织培养结合效果更好。;2、愈伤组织热处理脱毒法

;果树作物：桃(无黄萎病)、苹果(花叶病)、葡萄(扇叶病毒)、甜橙、香蕉、李子、醋栗、梨、树莓、红莓苔子、草莓等。

蔬菜作物：马铃薯、番茄、菠菜。

花卉植物：蔓生长春花、康乃馨、菊花等。

其他植物：曼陀罗等。;

例：烟草愈伤组织兼热处理钝化烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)获得无病毒株效果做法：

;3.低温处理脱除病毒;

二、化学措施

;运用这些化合物处理整株植物去病毒的效果虽不理想，但培养离体的组织、细胞和原生质体等却也许有良好效果。

如在培养基中加入2—硫尿嘧啶可以除去烟草愈伤组织中的PVY病毒，加入放线菌素D可以克制原生质体中的病毒复制等。;钝化、克制和清除植物病毒的某些化合物;

三、生物学措施

;（2）茎尖培养脱毒苗的措施;马铃薯的芽;茎尖的构造;微茎尖;马铃薯脱毒苗;;康乃馨不一样茎尖培养与康乃馨斑驳病毒的脱除状况;(3)茎尖培养法脱除植物病毒的技术关键;番茄：只能取生长锥或仅带一片叶原基的茎

尖进行培养；

撞羽矮牵牛：可取生长锥或带一两片叶原基

的茎尖进行培养；

???草：可取带4片叶原基的茎尖进行培养。

运用茎尖培养法脱除植物病毒时，最佳找出茎原基所带叶原基的数目与生长点(茎尖)大小的有关性，这样在取材时就以便多了。;茎原基0.05~0.08mm

茎原基带2片叶原基0.1~0.2mm

茎原基带4片叶原基0.3~0.4mm

茎原基带6片叶原基0.6~0.8mm

;②不一样病毒种类在同一种植物中分布部位不一样。;甘薯斑纹花叶病毒、缩叶花叶病毒：

分布于1.0-2.0mm以内的茎尖中

羽毛状花叶病毒：

分布于0.3-1.0mm以内茎尖中

马铃薯马铃薯卷叶病毒、Y病毒：

分布于1.0-3.0mm以内的茎尖中；

X病毒：分布于0.2-0.5mm以内的茎尖

G病毒：分布于0.2-0.3mm以内的茎尖

S病毒：0.2mm如下

;2.愈伤组织培养脱毒;愈伤组织脱病毒的机理;3.茎尖微体嫁接脱毒;苹果微体嫁接茎尖大小与脱毒成功率;苹果不一样取材时期对微体嫁接成功率的影响;试管微体嫁接在果树方面发展最快;(3)茎尖组织培养繁殖结合热处理可产生无病毒植物，因此，许多研究者认为对一般采用嫁接繁殖的果树进行试管嫁接是很合适的。

(4)试管微体嫁接除了可培育无病毒植株外，还可处理难以生根的园艺植物的生根问题和进行嫁接亲和力的研究。;4.珠心胚培养脱毒;①它与合子胚不一样，不是受精的产物，而是由体细胞产生的，因此具有和母体相似的遗传构成；

②与合子胚同样，在珠心胚和植株之间无维管组织连系，因此虽然母体植株感染了病毒，珠心胚也是无毒的；

③在自然条件下，珠心胚一般都不能发育成熟，只有适时从种子中剥离出来，接种在人工培养基上，珠心胚才能长成植株，而这些植株应当是不带病毒的母体无性系。;5.花药培养脱毒;三、分离茎尖的培养状况;第三种：是生长过旺，接种后茎尖明显增大，约培养一同后即在茎尖基部产生愈伤组织，但不易见到茎尖的伸长，组织颜色也较浅。这是由于培养茎生长素浓度偏高，或光照弱，温度高而导致的。